BD، 561665، معايير السيتوكينات Th1/Th2/Th17 للفئران من BD™، مصفوفة الخرزات الخلوية (CBA)

التحضير والتخزين: يُحفظ المعيار المجفف بالتجميد عند درجة حرارة 4 درجات مئوية قبل إعادة تكوينه. تُعادل الكريات المجففة بالتجميد من قارورة واحدة من معيار السيتوكينات Th1/Th2/Th17 للفأر، عند إعادة تكوينها في 2.0 مل من مخفف الاختبار، تقريبًا نشاط اختبار CBA لكل من IL-2، وIL-4، وIL-6، وIL-10، وIL-17A، والإنترفيرون غاما (IFN-γ)، وعامل نخر الورم (TNF) للفأر بتركيز 5000 بيكوغرام/مل. بعد إعادة التكوين، يُحفظ معيار السيتوكينات Th1/Th2/Th17 للفأر عند درجة حرارة 4 درجات مئوية ويُستخدم خلال 12 ساعة. يجب التخلص من أي معيار مُعاد تكوينه غير مستخدم بعد هذه المدة (لا يُخزن أو يُعاد استخدامه).
إجراءات التحليل الموصى بها: تم اختبار معيار السيتوكينات Th1/Th2/Th17 للفئران باستخدام مجموعة BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit (رقم المنتج 560485) لضمان فعاليته كمعيار في تحليل CBA. يُنصح الباحثون بالرجوع إلى دليل مجموعة CBA أو إلى التعليمات الموجزة أدناه (بروتوكول تحضير معيار السيتوكينات Th1/Th2/Th17 للفئران). يجب إعادة تكوين معيار السيتوكينات Th1/Th2/Th17 للفئران باستخدام مخفف التحليل المرفق مع مجموعة CBA المذكورة أعلاه (رقم المكون 51-2432KC) أو يمكن شراؤه بشكل منفصل (رقم المنتج 560104). تحضير معيار السيتوكينات Th1/Th2/Th17 للفئران: معيار السيتوكينات Th1/Th2/Th17 للفئران مُجفف بالتجميد، ويجب إعادة تكوينه وتخفيفه بالتسلسل قبل مزجه مع خرزات التقاط CBA وكواشف الكشف PE. 1. افتح قارورة واحدة من معيار السيتوكينات Th1/Th2/Th17 المُجفف بالتجميد للفئران. انقل جميع الكريات المُجففة إلى أنبوب بولي بروبيلين سعة 15 مل (BD Falcon™، رقم المنتج 352097). ضع ملصق "المعيار العلوي" على الأنبوب. 2. أعد تكوين المعيار بإضافة 2.0 مل من مُخفف المعايرة. اترك المعيار المُعاد تكوينه ليتوازن لمدة 15 دقيقة على الأقل قبل إجراء التخفيفات. امزج البروتين المُعاد تكوينه باستخدام ماصة فقط. لا تقم بالرج أو الخلط بقوة. ٣. ضع علامات على ١٢ أنبوبًا إضافيًا بحجم ٧٥ مم (BD Falcon™، رقم المنتج ٣٥٢٠٠٨) ورتبها بالترتيب التالي: المعيار الأعلى، ١:٢، ١:٤، ١:٨، ١:١٦، ١:٣٢، ١:٦٤، ١:١٢٨، و١:٢٥٦. ٤. أضف ٣٠٠ ميكرولتر من مخفف المعايرة إلى كل أنبوب من أنابيب التخفيف. ٥. قم بإجراء تخفيف متسلسل بنقل ٣٠٠ ميكرولتر من المعيار الأعلى إلى أنبوب التخفيف ١:٢ واخلط جيدًا. لا تستخدم جهاز الخلط الدوامي، بل اخلط باستخدام الماصة فقط. استمر في إجراء التخفيفات المتسلسلة بنقل ٣٠٠ ميكرولتر من أنبوب ١:٢ إلى أنبوب ١:٤ وهكذا حتى أنبوب ١:٢٥٦ واخلط جيدًا. جهز أنبوبًا واحدًا يحتوي على مخفف المعايرة فقط ليكون بمثابة عينة التحكم السلبية بتركيز ٠ بيكوغرام/مل.
إشعارات المنتج: يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. ProClin هي علامة تجارية لشركة Rohm and Haas. تحذير: يحتوي معيار CBA المجفف بالتجميد على 0.02% (وزن/وزن)، ويحتوي كاشف الكشف (الجزء أ) على 0.002% (وزن/وزن) من خليط CMIT/MIT (3:1)، وهو خليط من: 5-كلورو-2-ميثيل-4-أيزوثيازولين-3-ون [رقم EC 247-500-7] و2-ميثيل-4-أيزوثيازولين-3-ون [رقم EC 220-239-6] (3:1). بيان المخاطر: قد يُسبب رد فعل تحسسي جلدي. بيانات الاحتياطات: لا يُسمح بإخراج ملابس العمل الملوثة من مكان العمل. ارتدِ قفازات واقية/واقي للعينين/واقي للوجه. ارتدِ ملابس واقية. تجنب استنشاق الرذاذ/الأبخرة/البخاخ. في حال حدوث تهيج أو طفح جلدي: استشر طبيباً. في حال ملامسة الجلد: اغسل جيداً بالماء. انزع الملابس الملوثة واغسلها قبل إعادة استخدامها. تخلص من المحتويات/العبوة وفقاً للوائح المحلية/الإقليمية/الوطنية/الدولية.