BD، 559327، BD Pharmingen™ PE مضاد IFN-γ بشري للفأر

الاسم البديل: IFNG؛ انترفيرون جاما. انترفيرون γ؛ إنترفيرون من النوع الثاني؛ ماف
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
مناعة: بروتين IFN-γ البشري المؤتلف
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_397224
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يُعدّ الجسم المضاد B27 المقترن بـ PE مفيدًا للتلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة للإنترفيرون غاما (IFN-γ) ضمن مجموعات الخلايا المختلطة (انظر الصورة). تمت معايرة تركيبة 100 اختبار من الجسم المضاد B27 المقترن بـ PE مسبقًا لضمان الكشف الفعال داخل الخلايا عن الإنترفيرون غاما البشري (IFN-γ) باستخدام 20 ميكرولتر لكل 1 × 10⁶ خلية. للاطلاع على المنهجية المحددة، يُرجى زيارة موقعنا الإلكتروني http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources والرجوع إلى قسم البروتوكولات تحت عنوان "السيتوكينات (التلوين داخل الخلايا)" أو "التدفق داخل الخلايا". يتوفر أيضًا عنصر تحكم مناسب من نوع IgG1 للفأر لتقييم مستوى التلوين الخلفي على الخلايا البشرية المثبتة بالبارافورمالديهايد والمنفذة بالصابونين، وذلك في تركيبة بحجم 100 اختبار PE-MOPC-21 (رقم المنتج 559320). يُعدّ ما يلي عنصر تحكم مفيدًا لإثبات خصوصية التلوين: حجب الخلايا المثبتة بالبارافورمالديهايد والمنفذة بالصابونين مسبقًا باستخدام جسم مضاد B27 غير موسوم (رقم المنتج 554699/550011) قبل التلوين. وصف كلٌّ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية تلوين السيتوكينات داخل الخلايا وعناصر التحكم في الحجب بالتفصيل. ملاحظة هامة: لا يحتوي محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا على عامل نفاذية للخلايا. من الضروري إضافة عامل نفاذية للخلايا عند استخدام محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا لتلوين الخلايا المثبتة والمنفذة. يحتوي محلول Perm/Wash™ (رقم المنتج 554723) على عامل النفاذية سابونين، وهو مفيد لهذا الغرض كما هو موضح في قسم الاستخدام أدناه. طريقة الاستخدام: 1. أعد تعليق 1 × 10^6 خلية مثبتة ومنفذة في 20 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا و30 ميكرولتر من محلول Perm/Wash™ بتركيز 1X. 2. حضّن معلق الخلايا لمدة 15 دقيقة (4 درجات مئوية، في الظلام). 3. اغسل مرتين باستخدام 100 ميكرولتر من محلول Perm/Wash™ بتركيز 1X.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في ماء جارٍ قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.