BD، 556347، BD Pharmingen™ مضاد VHL نقي من الفئران

الاسم البديل: بروتين فون هيبل-لينداو؛ RCA1؛ HRCA1
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، فأر (تم الإبلاغ عنه)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
المستضد: بروتين VHL البشري المؤتلف، الأحماض الأمينية 1-213
التطبيق: الكيمياء المناعية النسيجية - الفورمالين (يلزم استرجاع المستضد) (يتم اختباره بشكل روتيني)، الترسيب المناعي (تم الإبلاغ عنه)، لطخة ويسترن (غير موصى به)
الوزن الجزيئي المستهدف: 21-30 كيلو دالتون
التركيز: 0.5 ملغم/مل
RRID: AB_396376
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي بواسطة كروماتوغرافيا التقارب.
إجراءات التحليل الموصى بها: لطخة ويسترن: لا يُنصح باستخدام الجسم المضاد Ig32 في لطخة ويسترن، حيث تبين أنه يتعرف على حزمة غير محددة أعلى بروتين VHL. مع ذلك، أظهرت دراسات التداخل الرناوي (RNAi) أن الجسم المضاد Ig32 يتعرف على حزمة أضعف أسفل هذه الحزمة الرئيسية. كما أفادت مختبرات باستخدام خط خلايا سرطانة غدية كلوية 786-O (ATCC CRL-1932، خالية من VHL)، أو siRNA، أو الإفراط في التعبير عن VHL، لإثبات أن الجسم المضاد Ig32 يتعرف على بروتين VHL بشكل خاص. لذلك، نوصي باستخدام الجسم المضاد Ig32 في أنظمة الإفراط في التعبير أو في ظروف طبيعية (غير مُشوهة) مثل التلوين المناعي النسيجي أو تطبيقات الترسيب المناعي. الكيمياء النسيجية المناعية: يُعد الجسم المضاد Ig32 مفيدًا في التلوين المناعي النسيجي. بعد المعالجة المسبقة باستخدام ريتريفاجين أ، يُنصح باستخدام جسم مضاد Ig32 نقي بتركيز يتراوح بين 2.5 و5 ميكروغرام/مل، مع معايرته للحصول على أفضل تلوين مناعي نسيجي غير مباشر. يمكن تصوير الأنسجة من خلال إجراء تلوين من ثلاث خطوات باستخدام جسم مضاد ثانوي بيوتين غوت مضاد للفأر Ig (رقم المنتج 550337) وستربتافيدين-HRP (رقم المنتج 550946) مع مجموعة ركيزة DAB (رقم المنتج 550880). كما يمكن استخدام مجموعة الكشف عن مضاد الفأر Ig HRP (رقم المنتج 551011) التي تحتوي على الجسم المضاد الثانوي البيوتينيلاتي، ومخفف الأجسام المضادة، وستربتافيدين-HRP، وركيزة DAB، لتسهيل عملية التلوين. للحصول على معلومات حول التلوين المناعي النسيجي على مقاطع البارافين، يُرجى الرجوع إلى الرابط التالي: http://www.bdbiosciences.com/documents/Immuno_Prep_Stain_Paraffin.pdf. يمكن الاطلاع على معلومات إضافية حول البروتوكول على الرابط التالي: http://www.bdbiosciences.com/support/resources/cell_biology/index.jsp. الترسيب المناعي: أُفيد بأن الجسم المضاد Ig32 المُنقّى مفيد في ترسيب بروتين VHL البشري الأصلي. يُرجى ملاحظة أن هذا التطبيق لا يُختبر بشكل روتيني في مختبر BD Biosciences Pharmingen. يُنصح الباحثون بتحديد التركيزات المثلى لكل تطبيق على حدة.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.