سيتيفا، 28904258، مجموعة تحضير الجينوم البكتيري المصغرة

مجموعة تحضير الجينوم البكتيري المصغرة، 50
تم تصميم مجموعة Bacteria genomicPrep Mini Spin Kit للاستخلاص السريع وتنقية الحمض النووي الجينومي عالي الوزن الجزيئي (gDNA) من البكتيريا سالبة الجرام (G-) وموجبة الجرام (G+).
• إجمالي وقت استخلاص الحمض النووي أقل من ساعة واحدة مع تقليل وقت التحلل
• يمكن استخدامه لتنقية 4 إلى 8 ميكروغرام من الحمض النووي الجينومي من 2 × 10⁹ خلية بكتيرية بكميات إدخال تتراوح من 1 × 10⁹ إلى 4 × 10⁹ خلية بكتيرية
• توفر أعمدة الطرد المركزي، المعبأة مسبقًا بغشاء السيليكا، قابلية تكرار واتساقًا ممتازين
• تم التحقق من صحته في العديد من التطبيقات اللاحقة بما في ذلك تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR)، وتفاعل البوليميراز المتسلسل الطويل (long PCR)، وعمليات الهضم باستخدام إنزيمات التقييد
• مُرمّزة بالألوان لسهولة الاستخدام
تحتوي معظم البكتيريا على جينوم يتكون من جزيء DNA واحد (أي كروموسوم واحد يبلغ حجمه عدة ملايين من أزواج القواعد وهو "دائري"): بدون نهايات مثل كروموسومات الكائنات حقيقية النواة). بالإضافة إلى ذلك، قد تحتوي البكتيريا على جزيء DNA دائري واحد أو أكثر أصغر حجمًا، يُسمى البلازميدات، والذي يحتوي عادةً على جينات غير أساسية.
يوجد الحمض النووي الجينومي في الكروموسومات، وهو أطول بكثير وأعلى وزنًا جزيئيًا من الحمض النووي البلازميدي. يُمثل الحمض النووي الجينومي الشفرة الوراثية للجينوم، وهو ما يُستخدم في تسلسل الجينوم، وفي تطبيقات أخرى مثل تحديد النمط الجيني للبكتيريا وتسلسل الميكروبيوم. يُفضل في التسلسل أن تسمح طرق استخلاص الحمض النووي البكتيري المستخدمة بجمع الحمض النووي الجينومي السليم في أطول أجزاء ممكنة. يُمكن لمجموعة أدوات استخلاص الحمض النووي الجينومي أن تُساعد في توحيد الإجراءات المُستخدمة لتحضير عينات الحمض النووي الجينومي البكتيري لمزيد من التحليل. يُمكن استخدام مجموعة أدوات استخلاص الحمض النووي الجينومي المصغرة (Bacteria genomicPrep Mini Spin Kit) لاستخلاص الحمض النووي الجينومي من مجموعة واسعة من السلالات البكتيرية مثل DH5α وTOP10 وJM109 وBacillus subtilis وغيرها. تُنتج هذه المجموعة حمضًا نوويًا جينوميًا عالي النقاء وسليمًا بقيم امتصاص ضوئي عند 260 نانومتر/280 نانومتر تتراوح بين 1.75 و1.85. توفر هذه الطريقة الحمض النووي بتراكيز مناسبة للتطبيقات اللاحقة، مثل تحديد النمط الجيني للبكتيريا واختبار الميكروبيوم لتحديد أنواع البكتيريا، بالإضافة إلى تقنيات أكثر شيوعًا مثل الهضم بالإنزيمات المقيدة، وتفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR)، وتفاعل البوليميراز المتسلسل الطويل (long PCR). تعتمد هذه الطريقة على استخدام محلول تحلل مع بروتينيز K لتحرير الحمض النووي الجينومي من الخلايا البكتيرية في المحلول. يُزال البروتين من الحمض النووي في محلول الاستخلاص، ثم يُربط الحمض النووي الجينومي بعمود سيليكا في وجود محلول فوضوي. تُزال الملوثات خلال خطوات الغسل، ويُستخلص الحمض النووي النقي باستخدام محلول TE مُسخن مسبقًا.