ميرك، 5893801001، راتنج تنقية علامة الهيستيدين cOmplete™

حجم الخرز: من 45 إلى 165 ميكرومتر. سعة الارتباط: ≥ 40 ملغ بروتين لكل مل من حجم طبقة الراتنج. قد تختلف سعة ارتباط الراتنج بأنواع البروتينات المختلفة تبعًا لخصائص البروتين، مثل حجمه. ترتبط أعمدة تنقية cOmplete His-Tag بانتقائية عالية بالبروتين الموسوم بالهيستيدين المتعدد. ونتيجة لذلك، قد تبدو حركية الارتباط مختلفة مقارنةً بمصفوفات مخلبات المعادن التقليدية. يمكن تحقيق السعة الكاملة لأعمدة تنقية cOmplete His-Tag من خلال إتاحة وقت أطول لارتباط البروتين بالراتنج عن طريق خفض معدل التدفق أثناء عملية تنقية الكروماتوغرافيا. أقصى معدل تدفق خطي: ​​1420 سم³/ساعة. معدل التدفق الحجمي الموصى به: يعتمد معدل التدفق الحجمي على مساحة المقطع العرضي للعمود. باستخدام الصيغة التالية، يمكن تحويل معدل التدفق الخطي إلى تدفق حجمي (مل/دقيقة): معدل التدفق الخطي (سم/ساعة) × مساحة المقطع العرضي للعمود (سم²) / 60. تُعرَّف مساحة المقطع العرضي للعمود بأنها π × r²، حيث π هو الثابت باي و r هو نصف القطر الداخلي للعمود. تركيز الإيميدازول الموصى به للتحميل/الغسل: يكون الارتباط غير النوعي للبروتينات الخالية من علامة الهيستيدين منخفضًا. استخدم ما يصل إلى 5 ملي مولار من الإيميدازول في محاليل التحميل و/أو الغسل. عند إنشاء فحص جديد لتنقية بروتينات علامة الهيستيدين باستخدام أعمدة تنقية cOmplete His-Tag، لا تستخدم الإيميدازول. إذا، على سبيل المثال، كانت هناك حاجة لتحسين نقاء بروتين علامة الهيستيدين بعد هذه الخطوة الأولى، استخدم الإيميدازول بتركيز نهائي يصل إلى 5 ملي مولار في خطوة ثانية. تركيز الإيميدازول الموصى به للإذابة: ما يصل إلى 500 ملي مولار. يرجى الملاحظة: على عكس أنواع الراتنجات الأخرى المتوفرة، عادةً ما ينفصل البروتين المرتبط بعلامة الهيستيدين من أعمدة تنقية cOmplete His-Tag بتركيز إيميدازول منخفض، على سبيل المثال، من 25 إلى 45 ملي مولار. التوافق للتخزين طويل الأمد: 20% إيثانول، درجة حموضة من 4.0 إلى 9.0. التوافق أثناء الاستشراب: يتوافق الراتنج مع 10 ملي مولار من EDTA و10 ملي مولار من DTT أثناء التنقية (حضانة لمدة ساعة واحدة)، و6 مولار من غوانيدينيوم هيدروكلوريد، و8 مولار من اليوريا، درجة حموضة من 2.0 إلى 14.0. التوافق أثناء التنظيف: 4% SDS