Product Description
مجموعة استنساخ pENTR™/SD/D-TOPO™، مع بكتيريا الإشريكية القولونية One Shot™ Mach1™-T1R المُؤهلة كيميائيًا. تستخدم مجموعات استنساخ pENTR™/SD/D-TOPO™ استراتيجية استنساخ عالية الكفاءة تستغرق 5 دقائق ("استنساخ TOPO™") لاستنساخ منتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ذي النهايات غير المتداخلة بشكل موجه في ناقل لإدخاله في نظام Gateway™ أو نظام MultiSite Gateway™. يتم استنساخ منتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ذات النهايات غير المتداخلة بشكل موجه في ناقل الإدخال pENTR™/SD/D-TOPO™ بكفاءة تزيد عن 90%، وتتضمن تسلسل Shine-Dalgarno في الاتجاه المعاكس للتعبير في بدائيات النوى.
تأتي المجموعة بكل ما يلزم لاستنساخ واختيار الجين الذي ترغب في تضخيمه بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR):
• جاهز لنظام Gateway™ - ينقل الجينات المستنسخة بسرعة بين أنظمة ناقلات متعددة
• سريع وسهل - انتقل من تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) إلى استنساخ Gateway™ Entry في 3 خطوات فقط وفي غضون 5 دقائق فقط من العمل اليدوي
• فعال - يحقق أكثر من 90% من الاستنساخ مع الإدخال الصحيح في الاتجاه الصحيح
• أداء موثوق به ومثبت لأكثر من عقد من الزمان. نظرة عامة على مجموعات استنساخ pENTR™/SD/SD D-TOPO™: ناقل pENTR™ /SD SD/SD D-TOPO™: ناقل استنساخ اتجاهي للدخول إلى نظام Gateway™ ومُحسَّن للتعبير في بدائيات النوى. طريقة الاستنساخ: استنساخ TOPO™ الاتجاهي: ربط اتجاهي يعتمد على إنزيم توبويزوميراز I لمدة 5 دقائق تقريبًا لمنتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المُضخَّمة بواسطة بوليميراز التدقيق ذي النهايات غير المتداخلة بالناقل. الخلايا المؤهلة: خياران: اختر من بين مجموعات ذات كفاءة عالية أو خلايا مؤهلة سريعة النمو. وصول بسيط إلى نظام Gateway™: للوصول إلى نظام Gateway™، ما عليك سوى تضخيم الجين الذي ترغب فيه باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وإضافة المنتج مباشرةً إلى ناقل pENTR™ /SD SD/SD D-TOPO™ المُزوَّد بإنزيم توبويزوميراز، وحضانته لمدة 5 دقائق، ثم تحويل خلايا E. coli المؤهلة المُزوَّدة. تكون نسخ attL الناتجة التي تحتوي على Gateway™ Entry جاهزة لإعادة التركيب الفعال مع اختيارك من متجهات Gateway™ Destination.
ناقل pENTR™ /SD SD/SD D-TOPO™ المُحسَّن: يتضمن ناقل pENTR™ /SD SD/SD D-TOPO™ (الشكل 1) مُحسِّن ترجمة جين T7 10 وموقع ارتباط الريبوسوم (RBS) للتعبير الأمثل عن البروتين الأصلي بعد إعادة التركيب مع نواقل Gateway™ بدائية النواة. كما يُمكن استخدام هذا الناقل للتعبير في أنظمة مضيفة أخرى عن طريق إعادة التركيب مع نواقل وجهة مختلفة. يحتوي الناقل على مواقع تسلسل بادئات M13 وT7 ومواقع إعادة تركيب attL تُحيط بموقع إدخال ناتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يُتيح ذلك التحقق من تسلسل المستنسخات بسهولة وإعادة تركيبها في نواقل Gateway™ التي تحتوي على attR والتي تختارها. يُستخدم جين مقاومة الكاناميسين وأصل pUC للاختيار والتكاثر عالي النسخ في بكتيريا الإشريكية القولونية.
استنساخ اتجاهي مُبسّط: مع تقنية الاستنساخ الاتجاهي TOPO™، لا حاجة لتنقية نواتج تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)، أو تحضير النواقل، أو غيرها من خطوات معالجة الحمض النووي التي تستغرق وقتًا طويلاً. ما عليك سوى إضافة تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) مباشرةً إلى الناقل المُزوّد بإنزيم توبويزوميراز، وحضانته لمدة 5 دقائق، ثم تحويله، لتحصل على ما يصل إلى 90% من المستنسخات المُدخلة اتجاهيًا. يتزاوج طرف مُتدلٍّ من أربع قواعد على الناقل مع تسلسل من أربع قواعد مُصمّم في البادئ الأمامي المُستخدم في تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) لتوفير الاتجاهية لتفاعل ربط إنزيم توبويزوميراز (الشكل 2).
قوة تقنية الاستنساخ بالتركيب Gateway™: تتجاوز تقنية الاستنساخ بالتركيب Gateway™ قيود الاستنساخ المعتمد على إنزيمات التقييد، مما يتيح لك الوصول إلى أي نظام تعبير جيني تقريبًا في تفاعل تركيب Gateway™ بسيط وسريع (ساعة واحدة فقط)، بكفاءة 99% وقابل للعكس. إن القدرة على نقل نفس تسلسل الحمض النووي بين نواقل مختلفة دون استخدام إنزيمات التقييد أو الليغاز أو خطوات الاستنساخ الفرعي أو فحص عدد لا يحصى من المستعمرات أو إعادة التسلسل، ستساعدك على توفير الوقت والمال والجهد.
تقنيات الاستنساخ الرائدة: عندما يتعلق الأمر بالاستنساخ، فقد كانت تقنية استنساخ TOPO™ وتقنية إعادة التركيب Gateway™ شريكًا موثوقًا به لآلاف العلماء لأكثر من عشر سنوات. تتميز تقنيتا TOPO™ و Gateway™ بالسرعة وسهولة الاستخدام والكفاءة، مما يسمح بالاستنساخ السريع ونقل الجينات لاحقًا بين مجموعة واسعة من نواقل التعبير Gateway™.
خيارات المجموعة: يمكن شراء مجموعة الاستنساخ pENTR™/SD/D-TOPO™ إما بخلايا TOP10 المؤهلة للاستنساخ القياسي أو بخلايا Mach1™-T1R المؤهلة للنمو السريع.
للاستخدام البحثي فقط. غير مخصص للاستخدام في العلاج أو التشخيص على الحيوانات أو البشر.
طريقة الاستنساخ: TOPO™ الاتجاهي
عدد التفاعلات: 20 تفاعلاً
خط الإنتاج: ون شوت™
نوع المنتج: طقم استنساخ TOPO
الكمية: 20 تفاعلاً
المتجه: بينتر
حجم الوحدة: كل وحدة
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924