Product Description
مجموعة إثراء الليزوزومات للأنسجة والخلايا المستنبتة: تُمكّن مجموعة Thermo Scientific™ لإثراء الليزوزومات للأنسجة والخلايا المستنبتة من عزل الليزوزومات السليمة وإثرائها من مستخلصات الخلايا والأنسجة الخام. توفر المجموعة كمية كافية من الكواشف لتحضير 25 مستخلصًا، وتستخدم وسائط فصل الخلايا OptiPrep لفصل الليزوزومات عن تراكيب الخلايا الملوثة بناءً على الكثافة. يمكن استخدام الليزوزومات المعزولة في عدد من التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك التحليل الطيفي ثنائي الأبعاد/مطياف الكتلة لأبحاث البروتينات، والمجهر الإلكتروني، وتوصيف الأمراض، والتعبير الجيني، ونقل الإشارات، والتفاعل أو التموضع.
مميزات مجموعة إثراء الليزوزومات للأنسجة والخلايا المستنبتة:
• فعال وسهل الاستخدام - تعمل كواشف المجموعة والطرد المركزي المتدرج على فصل العضيات عن الهياكل الملوثة
• متوافق - تحضير العينات للتطبيقات اللاحقة، بما في ذلك التحليل الطيفي ثنائي الأبعاد/مطياف الكتلة، والمجهر الإلكتروني، وتوصيف الأمراض، والتعبير الجيني، ونقل الإشارات، ودراسات التفاعل أو التموضع.
• مجموعة كاملة - تحتوي كل مجموعة على مواد كافية لـ 25 استخدامًا. تُمكّن هذه المجموعة من استخلاص العضيات السليمة من الخلايا والأنسجة. تستخدم كل مجموعة تقنية الطرد المركزي بتدرج الكثافة لفصل العضيات عن التراكيب الخلوية الملوثة. يمكن استخدام العضيات المعزولة في عدد من التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك التحليل الطيفي ثنائي الأبعاد/مطياف الكتلة، والمجهر الإلكتروني، وتوصيف الأمراض، ودراسة التعبير الجيني، ونقل الإشارات، ودراسات التفاعل أو التموضع.
استخلاص العضيات من الأنسجة: صُومت إناث فئران سلالة سبريج-داولي، بعمر ستة إلى ثمانية أسابيع، بمتوسط وزن 160 غرامًا، طوال الليل قبل التضحية بها. استُؤصل الكبد والكليتان، وغُسلتا بمحلول فوسفات ملحي بارد، ثم فُرمتا باستخدام مقص جراحي، وجُنستا في محلول بارد من الكاشف (أ) باستخدام جهاز Polytron™ Tissue Tearer لمدة 45 ثانية بسرعة 8000 دورة في الدقيقة. أُضيف الكاشف (ب) لاحقًا، وخُضعت العينة المتجانسة للطرد المركزي لإزالة الحطام الخلوي. وُضع الراسب الناتج فوق تدرج غير متصل من وسط فصل الخلايا OptiPrep™، وخُضع للطرد المركزي لعزل العضية المستهدفة واستخلاصها. أُزيلت الحزمة المستهدفة من التدرج وحُللت باستخدام تقنية Western blotting.
استخلاص العضيات من الخلايا: تم فحص عدة سلالات خلوية لعزل الليزوزومات: خلايا A431 [المجموعة الأمريكية لزراعة الأنسجة (ATCC™ Resource Center)، #CRL-1555]، وخلايا HeLa (ATCC، #CCL-2)، وخلايا HepG2 (ATCC، #HB-8065). تمت زراعة الخلايا حتى وصلت إلى كثافة 80-90%. تم جمع ما يقارب 50-200 ملغ من معجون الخلايا الرطب ومعالجته لاستخلاص الليزوزومات. أُضيف كاشف الليزوزوم A البارد إلى الخلايا، وتم إجراء عملية التحلل باستخدام جهاز Misonix Sonicator 3000 بـ 15 نبضة بقوة 15 واط.
بعد ذلك، أُضيف كاشف الليزوزوم B، وخُضعت العينة المتجانسة للطرد المركزي لإزالة الحطام الخلوي. وُضع الراسب الناتج فوق عدة تدرجات غير متصلة من وسط فصل الخلايا OptiPrep، وخُضع للطرد المركزي لعزل العضية المستهدفة وتركيزها. أُزيلت الحزمة المستهدفة من التدرج، وتمت معايرتها مع المستخلص الكلي وفقًا لكمية البروتين (ما لم يُذكر خلاف ذلك)، ثم حُللت باستخدام تقنية التلطيخ الغربي.
الكمية: 230 مل
نوع الكاشف: عزل العضيات، تجزئة الخلايا الفرعية
يكفي لـ: 25 عينة من الخلايا أو الأنسجة، وزن كل منها من 50 إلى 200 ملغ
الشكل: سائل
نوع المنتج: مجموعة إثراء الليزوزومات
حجم الوحدة: كل وحدة
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924