Product Description
مجموعة RecoverAll™ لاستخلاص الأحماض النووية الكلية من الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين (FFPE): تُستخدم هذه المجموعة لاستخلاص الأحماض النووية الكلية من الأنسجة المثبتة بالفورمالين أو البارافورمالين والمضمنة في البارافين (FFPE). تحتوي المجموعة على كميات كافية من الكواشف لإجراء 40 عملية تنقية من أربعة مقاطع نسيجية بسمك 20 ميكرومتر كحد أقصى، أو من عينات لبية غير مقطعة بوزن يصل إلى 35 ملغ لكل مقطع. مميزات مجموعة RecoverAll™ لاستخلاص الأحماض النووية الكلية من الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين (FFPE):
• مُحسَّن لعزل الأحماض النووية الكلية، بما في ذلك الحمض النووي الريبي الميكروي، من أنسجة FFPE
• لا حاجة للهضم باستخدام بروتينيز K طوال الليل - قم بإزالة البارافين في الصباح وقم بإجراء تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (qRT-PCR) في فترة ما بعد الظهر
• عادةً ما تكون نسبة العوائد أكثر من 50% من تلك الخاصة بالأنسجة غير المثبتة
تُعدّ الأحماض النووية المُستخلصة مناسبة لتقنيات التسلسل الجيني من الجيل التالي، والتفاعل التسلسلي للبوليميراز العكسي في الوقت الحقيقي (RT-PCR)، وتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، وفحص الطفرات، وتحليلات المصفوفات الدقيقة. يُستخلص الحمض النووي من عينات الأنسجة المحفوظة، التي تحتوي على معلومات قيّمة عن الحالات المرضية، ولكن كان من الصعب تقليديًا عزل الأحماض النووية منها بجودة مناسبة للتحليل الجزيئي. تستخدم تقنيات الحفظ القياسية الفورمالين الذي يحافظ على بنية الأنسجة ويمنع تعفنها، ولكنه يحبس أيضًا الأحماض النووية ويُعدّلها من خلال الروابط المتشابكة بين البروتينات والبروتينات، وبين البروتينات والأحماض النووية. غالبًا ما يكون الحمض النووي الريبوزي (RNA) (وإلى حد ما الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين DNA) مُجزّأً ومُعدّلاً كيميائيًا لدرجة تجعله غير متوافق مع العديد من تقنيات التحليل الجزيئي. لا يُمكن عكس تجزئة الحمض النووي الريبوزي في أنسجة FFPE؛ ومع ذلك، صُممت ظروف هضم البروتياز في مجموعة RecoverAll™ لإطلاق أقصى كمية (انظر الشكل) من شظايا الحمض النووي الريبوزي المحصورة بجميع الأحجام، بما في ذلك الحمض النووي الريبوزي الميكروي (microRNA)، في فترة زمنية قصيرة نسبيًا.
محلول مجموعة عزل الأحماض النووية الكاملة RecoverAll™: تتطلب عملية عزل الأحماض النووية الكاملة RecoverAll™ حوالي 45 دقيقة من العمل اليدوي، ويمكن إتمامها عادةً في أقل من يوم واحد لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي (RNA). تُزال طبقة البارافين من عينات الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين (FFPE) باستخدام سلسلة من عمليات الغسل بالزيلين والإيثانول. بعد ذلك، تُخضع العينات لهضم بروتيني مكثف مع فترة حضانة مُخصصة لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي (RNA) أو الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA). ثم تُنقى الأحماض النووية باستخدام طريقة الترشيح الزجاجي السريعة، وتُذاب إما في الماء أو في محلول منظم منخفض الملوحة.
الأحماض النووية ضرورية لأي تطبيق لاحق تقريبًا. كما هو الحال مع جميع أنسجة FFPE، فإن تثبيت العينات وتخزينها عادةً ما يؤدي إلى تفتت الأحماض النووية وتعديلها. لذلك، قد تتطلب التطبيقات اللاحقة، مثل تحليل المصفوفات الدقيقة، التي تتطلب كمية أكبر من الحمض النووي الريبوزي (RNA) النقي مقارنةً بتقنية qRT-PCR، تعديلًا للحصول على أفضل النتائج. على الرغم من أن الحمض النووي (DNA) لا يتفتت بسهولة مثل الحمض النووي الريبوزي (RNA)، إلا أنه يبدو أكثر تفاعلًا مع الفورمالين ويتطلب وقتًا أطول (يومين) للهضم بالبروتياز لتحرير كميات كبيرة منه.
حجم الإذابة: 60 ميكرولتر
نوع المنتج النهائي: الحمض النووي الريبي الكلي والحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين
للاستخدام مع (التطبيق): تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR)، تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR)، بناء مكتبة الحمض النووي المكمل (cDNA)، التسلسل الجيني من الجيل التالي (NGS)، تحليل المصفوفات الدقيقة، التهجين اللطخي، التهجين الشمالي/الجنوبي، الترجمة في المختبر، فحوصات الحماية من النيوكلياز، وسم الأحماض النووية، التهجين
التوافق مع الإنتاجية العالية: غير متوافق مع الإنتاجية العالية (يدوي)
مدة التنقية: 45 دقيقة (عمل يدوي)
الكمية: 40 حصة
شروط الشحن: الصندوق 1: درجة حرارة الغرفة، الصندوق 2: ثلج جاف
كمية المواد الأولية: شرائح نسيجية بسمك ≤80 ميكرومتر، 35 ملغ من اللب غير المقطع
الناتج: الحمض النووي: ≤3.
5 ميكروغرام لكل ملليغرام من FFPERNA: يختلف
تقنية العزل: عمود الدوران (مرشح الألياف الزجاجية)
نوع العينة: نسيج مُضمّن في البارافين (FFPE)
حجم الوحدة: كل وحدة
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924