Thermo Fisher، AM2682، مثبط إنزيم RNase من Ambion™، مستنسخ، 40 وحدة/ميكرولتر

مثبط إنزيم الريبونوكلياز Ambion™ بتركيز 2500 وحدة، وهو بروتين بشري مُعاد تركيبه يُنتج في بكتيريا الإشريكية القولونية، يُعد مثبطًا قويًا لإنزيمات الريبونوكلياز A البنكرياسية المتعادلة. آلية التثبيط غير تنافسية؛ حيث يرتبط المثبط بإنزيمات الريبونوكلياز بنسبة 1:1. يُباع في أنبوب واحد يحتوي على 10000 وحدة (40 وحدة/ميكرولتر). وقد ثبت أن هذا الإنزيم يُعطل إنزيمات الريبونوكلياز الموجودة في العديد من الأنسجة وأنواع الخلايا. كما ثبتت فائدة إضافة مثبط الريبونوكلياز (RI) عند الحاجة إلى الحفاظ على سلامة الحمض النووي الريبوزي (RNA)، كما هو الحال في تحضير الحمض النووي التكميلي (cDNA) عن طريق النسخ العكسي، ونسخ الحمض النووي الريبوزي في المختبر، وتخليق البروتينات في المختبر. لا يُثبط RI إنزيمات الريبونوكلياز I، أو T1، أو T2، أو H، أو U1، أو U2، أو CL3. يتطلب RI حدًا أدنى من 1 ملي مولار من ثنائي ثيوثريتول (DTT) للحفاظ على نشاطه، ويتراوح نطاق نشاطه عند درجة حموضة 5.
من 0 إلى 8.
0 مع أقصى نشاط بين درجة حموضة 7.
0 و 8.
0. بما أن آلية التثبيط هي تكوين مركب بنسبة 1:1 مع إنزيمات الريبونيوكلياز، فيجب توخي الحذر لتجنب تمسخ أو أكسدة مثبط الريبونيوكلياز (مثلًا).
(على سبيل المثال، بإضافة SDS أو اليوريا، إلخ). يجب إضافة مثبط الريبونوكلياز (RI) إلى تفاعلات النسخ والترجمة وتخليق الحمض النووي المكمل (cDNA) للحصول على تركيز نهائي قدره 1 وحدة/ميكرولتر. يخضع مثبط الريبونوكلياز لاختبارات صارمة للتأكد من خلوه من أي نشاط إنزيمي ملوث، بما في ذلك الريبونوكلياز، والإكسونوكلياز، والإندونوكلياز، والبروتياز.
تعريف الوحدة: الوحدة الواحدة هي كمية البروتين اللازمة لتثبيط نشاط 5 نانوغرام من إنزيم RNase A بنسبة 50%. شروط اختبار الوحدة: 100 ملي مولار من أسيتات التريس (الأس الهيدروجيني 6).
5) 1 ملي مول من EDTA، و1 ملي مول من 2'،3'-CMP الحلقي، ومثبط RNase. إضافة RNase A تبدأ التفاعل. يُقاس نشاط مثبط RNase من خلال تثبيط تحلل 2'،3'-CMP الحلقي بواسطة RNase A.
التركيز: 100 ملي مول
خط الإنتاج: أمبيون™
الكمية: 2500 وحدة
شروط الشحن: ثلج جاف
حجم الوحدة: كل وحدة