نظام الكشف عن فيروس الفئران الدقيقة (MMV) من شركة Thermo Fisher، رقم 4444415

نظام الكشف عن فيروس الفأر الدقيق (MMV) ViralSEQ™ من شركة Thermo Fisher، رقم 4444415. يُعدّ اختبار الكشف عن فيروس الفأر الدقيق (MMV) ViralSEQ™ من شركة Applied Biosystems جزءًا من نظام متكامل لتنقية الحمض النووي وتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (PCR) للكشف السريع والحساس عن فيروس MMV من مجموعة واسعة من أنواع العينات. يتم عزل الحمض النووي الفيروسي من العينة باستخدام مجموعة استخلاص الأحماض النووية PrepSEQ 1-2-3 (متوفرة بشكل منفصل). ثم يتم إجراء كشف عالي الحساسية والدقة للحمض النووي الفيروسي باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي TaqMan. يتضمن الاختبار جزيء تحكم إيجابي خاص يمنع احتمالية الحصول على نتيجة إيجابية خاطئة ناتجة عن تلوث عينة الاختبار عن غير قصد بجزيء التحكم الإيجابي.
يتميز اختبار ViralSEQ MMV بدقة عالية وسرعة في الحصول على النتائج، حيث يكشف عن السلالات الأربع المعروفة من فيروس موزاييك الفأر (MMV): i و p و m و c، بما في ذلك سبعة تسلسلات جينومية مُسجلة في قاعدة بيانات NCBI. يوضح الجدول 1 دقة اختبار ViralSEQ MMV وعدم وجود تفاعل متقاطع مع الحمض النووي غير ذي الصلة. يتميز الاختبار بسهولة إجراءاته، ويُظهر النتائج في أقل من 4 ساعات (الشكل 1).
عملية مبسطة للمراقبة والكشف المبكر: يُعد اختبار ViralSEQ للكشف عن فيروس MMV جزءًا من برنامج الطرق السريعة لزراعة الخلايا، المصمم لتبسيط عملية الكشف عن ثلاثة ملوثات شائعة في تصنيع المستحضرات الصيدلانية الحيوية القائمة على زراعة خلايا الثدييات (الشكل 2). يضع البرنامج معايير جديدة لسير العمل من حيث الكفاءة وجودة المنتج، إذ يجمع بين خطوة واحدة لتحضير العينة واختبارات تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي للكشف عن الميكوبلازما، وفيروس الحويصلات، وفيروس MMV على منصة جهاز واحدة.
نتائج موثوقة: يتضمن اختبار الكشف عن فيروس موزاييك الفأر (MMV) من ViralSEQ عنصر تحكم إيجابي/استخلاصي تمييزي لفيروس موزاييك الفأر، وهو عبارة عن بلازميد DNA يحتوي على تسلسل DNA الخاص بالفيروس والذي يتعرف عليه اختبار الكشف (مسبار FAM). صُمم عنصر التحكم هذا (الشكل 3) ليتصرف مثل DNA الخاص بفيروس موزاييك الفأر في كلٍ من تحضير العينة والكشف. بالإضافة إلى ذلك، تم تعديل عنصر التحكم بتسلسل ارتباط إضافي لمسبار VIC. يمكن استخدام وجود إشارتي FAM وVIC في تفاعل PCR للتمييز بين نتيجة الاختبار الإيجابية لفيروس موزاييك الفأر (FAM) وDNA عنصر التحكم (FAM وVIC). يُمكّن عنصر التحكم المبتكر هذا من إجراء اختبار تحكم خالٍ من المخاطر، مما يُلغي احتمالية الحصول على نتيجة اختبار إيجابية خاطئة نتيجة التلوث العرضي لعينة الاختبار بـ DNA عنصر التحكم الإيجابي.
الكشف على مستوى منخفض: يستخدم اختبار الكشف عن فيروس MMV من ViralSEQ تقنية TaqMan المثبتة للكشف عالي الحساسية حتى 10 نسخ من الحمض النووي الجينومي لفيروس MMV لكل تفاعل PCR (جسيمات فيروسية تعادل 0.
002 TCID50). يوضح تحليل التخفيفات المتسلسلة 10 أضعاف للحمض النووي الجينومي لـ MMV النطاق الديناميكي الواسع وكفاءة الفحص (الشكلان 4 و 5).
طريقة تحضير عينات فائقة: تساعد مجموعة استخلاص الأحماض النووية PrepSEQ 1-2-3 (متوفرة بشكل منفصل، رقم المنتج 4452222) على استخلاص الحمض النووي الجينومي لفيروس موزاييك الفأر (MMV) بنسبة عالية وثابتة من أنواع العينات المعقدة، بما في ذلك خلايا CHO ومصل الأبقار. يوضح الشكل 6 أن قيم العتبة (Ct) للحمض النووي المستخلص من عينة مُدعّمة كانت مماثلة لعينة تحكم غير مُدعّمة تم تضخيمها في تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي (PCR) في الوقت الحقيقي، مما يدل على كفاءة استخلاص الحمض النووي العالية باستخدام مجموعة PrepSEQ 1-2-3.
عدد التفاعلات: 100 تفاعل
خط الإنتاج: ViralSEQ™
نوع المنتج: نظام كشف الفيروسات في جهاز Mouse Minute
الكمية: 100 تفاعل
نوع العينة: الحمض النووي الفيروسي
الحساسية: ≥ 10 نسخ من الحمض النووي لفيروس موزاييك الفأر
شروط الشحن: ثلج جاف
النوع: فأر
فئة الكائن المستهدف: فيروس الفأر الدقيق (MMV)
التخصص في استهداف هدف محدد: خاص بالهدف
طريقة الكشف: البادئ والمسبار
أداء تفاعل البوليميراز المتسلسل الغني بالـ GC: عالٍ
طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل: تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي
سرعة رد الفعل: قياسية
حجم الوحدة: كل وحدة