Product Description
مجموعة استنساخ الحمض النووي pENTR™/D-TOPO™ من Thermo Fisher، رقم الموديل K240020SP. تستخدم هذه المجموعة استراتيجية استنساخ عالية الكفاءة وسريعة (استنساخ TOPO™) لاستنساخ منتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ذي النهايات غير المتداخلة بشكل موجه في ناقل لإدخاله في نظام Gateway™ أو نظام MultiSite Gateway™. يتم استنساخ منتجات PCR ذات النهايات غير المتداخلة بشكل موجه بكفاءة تزيد عن 90%، دون الحاجة إلى إنزيمات الربط أو إجراءات ما بعد تفاعل البوليميراز المتسلسل أو إنزيمات التقييد.
تأتي المجموعة بكل ما يلزم لاستنساخ واختيار الجين الذي ترغب في تضخيمه بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR):
• جاهز لنظام Gateway™ - ينقل الجينات المستنسخة بسرعة بين أنظمة ناقلات متعددة
• سريع وسهل - انتقل من تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) إلى استنساخ Gateway™ Entry في 3 خطوات فقط وفي غضون 5 دقائق فقط من العمل اليدوي
• فعال - تحقيق نسبة استنساخ تتجاوز 90% مع إدخال صحيح في الاتجاه الصحيح
• أداء موثوق به ومثبت لأكثر من عقد من الزمان. نظرة عامة على مجموعات استنساخ pENTR™ / D-TOPO™: ناقل pENTR™ / D-TOPO™: ناقل استنساخ موجه للدخول إلى نظام Gateway. طريقة الاستنساخ: استنساخ TOPO™ موجه: ربط موجه يعتمد على إنزيم توبويزوميراز I لمدة 5 دقائق تقريبًا لمنتجات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) المُضخمة بواسطة بوليميراز تصحيح النهايات غير المتداخلة بالناقل. الخلايا المؤهلة: خياران: اختر من بين مجموعات ذات كفاءة عالية أو خلايا مؤهلة سريعة النمو. سهولة الوصول إلى نظام Gateway™: للوصول إلى نظام Gateway™، ما عليك سوى تضخيم الجين المطلوب باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وإضافة الناتج مباشرةً إلى ناقل pENTR™ / D-TOPO™ المُزود بإنزيم توبويزوميراز، ثم حضانته لمدة 5 دقائق، وتحويل خلايا E. coli المؤهلة المُزودة. تكون مستنسخات الدخول إلى Gateway™ الناتجة، والتي تحتوي على attL، جاهزة لإعادة التركيب بكفاءة مع نواقل الوجهة إلى Gateway™ التي تختارها.
ناقل pENTR™/D-TOPO™ المُحسَّن: يحتوي ناقل pENTR™/D-TOPO™ (الشكل 1) على مواقع تسلسل بادئات M13 وT7، ومواقع إعادة تركيب attL تُحيط بموقع إدخال ناتج تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يُتيح ذلك التحقق من تسلسل المستنسخات بسهولة، وإعادة تركيبها في نواقل Gateway™ الوجهة التي تختارها والتي تحتوي على attR. يُستخدم جين مقاومة الكاناميسين ومنشأ pUC للاختيار والتكاثر عالي النسخ في بكتيريا الإشريكية القولونية.
استنساخ اتجاهي مُبسّط: مع تقنية الاستنساخ الاتجاهي TOPO™، لا حاجة لتنقية نواتج تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)، أو تحضير النواقل، أو غيرها من خطوات معالجة الحمض النووي التي تستغرق وقتًا طويلاً. ما عليك سوى إضافة تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) مباشرةً إلى الناقل المُزوّد بإنزيم توبويزوميراز، وحضانته لمدة 5 دقائق، ثم تحويله، لتحصل على ما يصل إلى 90% من المستنسخات المُدخلة اتجاهيًا. يتزاوج طرف مُتدلٍّ من أربع قواعد على الناقل مع تسلسل من أربع قواعد مُصمّم في البادئ الأمامي المُستخدم في تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) لتوفير الاتجاهية لتفاعل ربط إنزيم توبويزوميراز (الشكل 2).
قوة تقنية الاستنساخ بالتركيب Gateway™: تتجاوز تقنية الاستنساخ بالتركيب Gateway™ قيود الاستنساخ المعتمد على إنزيمات التقييد، مما يتيح لك الوصول إلى أي نظام تعبير جيني تقريبًا في تفاعل تركيب Gateway™ بسيط وسريع (ساعة واحدة فقط)، بكفاءة 99% وقابل للعكس. إن القدرة على نقل نفس تسلسل الحمض النووي بين نواقل مختلفة دون استخدام إنزيمات التقييد أو الليغاز أو خطوات الاستنساخ الفرعي أو فحص عدد لا يحصى من المستعمرات أو إعادة التسلسل، ستساعدك على توفير الوقت والمال والجهد.
تقنيات الاستنساخ الرائدة: عندما يتعلق الأمر بالاستنساخ، فقد كانت تقنية استنساخ TOPO™ وتقنية إعادة التركيب Gateway™ شريكًا موثوقًا به لآلاف العلماء لأكثر من عشر سنوات. تتميز تقنيتا TOPO™ و Gateway™ بالسرعة وسهولة الاستخدام والكفاءة، مما يسمح بالاستنساخ السريع ونقل الجينات لاحقًا بين مجموعة واسعة من نواقل التعبير Gateway™.
السلالة البكتيرية أو الخميرة: أفضل 10
نوع الخلية: بكتيريا الإشريكية القولونية ذات الكفاءة الكيميائية
طريقة الاستنساخ: استنساخ TOPO
للاستخدام مع (التطبيق): الاستنساخ
نوع المنتج: طقم استنساخ
الجهة المنظمة: T7
الكمية: 20 تفاعلاً
التنسيق: مجموعة
حجم الوحدة: كل وحدة
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924