BD، 550618، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 Mouse IgG1 κ Isotype Control

النمط المصلي: IgG1، κ للفأر BALB/c
التطبيق: قياس التدفق الخلوي، التحكم في النمط المتماثل (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.2 ملغم/مل
RRID: AB_479689
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy5 (المعروف سابقًا باسم BD Cy-Chrome™) في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط و PE-Cy5 الحر. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات التحليل الموصى بها: يجب استخدام عينة تحكم متماثلة النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب (على سبيل المثال، ≤ 1 ميكروغرام/مليون خلية في قياس التدفق الخلوي). نوصي باستخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة MOPC-21 من نوع IgG1 κ المرتبط بـ PE-Cy5 (رقم المنتج 555750) للتلوين المناعي الفلوري للدم البشري الكامل، والجسم المضاد أحادي النسيلة MOPC-21 (رقم المنتج 557224) لخلايا الرئيسيات غير البشرية. وقد أشارت التقارير إلى أن صبغات PE-Cy5 المزدوجة ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أشارت التقارير إلى أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc. يمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا باستخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المضاد لـ CD16/CD32 للفئران (رقم المنتج 553141/553142) المُنقّى بواسطة Mouse BD Fc Block™ من الارتباط غير النوعي للكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 بخلايا B للفئران. علاوة على ذلك، لاحظنا نوعًا مميزًا من التفاعل بين الفلوركرومات المزدوجة PE-Cy5 وخلايا الطحال لفئران SJL وNOD وMRL: حيث تتلون الخلايا اللمفاوية B وبعض المجموعات الفرعية الأخرى من كريات الدم البيضاء بشكلٍ واضح، ولا يُظهر Mouse BD Fc Block™ أي تأثير يُذكر. لذلك، لا يُنصح باستخدام الكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين كريات الدم البيضاء لفئران SJL أو NOD أو MRL. يمكن استخدام الكواشف المقترنة بـ PE و PerCP و PerCP-Cy5.5 و Allophycocyanin (APC) و APC-Cy7 الفلوروفور المزدوج على الكريات البيضاء من سلالات الفئران هذه.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى مراجعة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوركروم مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر. نظراً لطيف الامتصاص الواسع لصبغة PE-Cy5 الفلورية المزدوجة، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، والتي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. تتكون PE-Cy5 من صبغة فلورية مزدوجة، تتألف من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بواسطة ضوء 488 نانومتر من ليزر أيون الأرجون ويعمل كمانح للطاقة، مقترنة بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة عند 670 نانومتر. وقد حسّنت شركة BD Biosciences Pharmingen نقل طاقة الصبغة الفلورية في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما زاد من شدة انبعاث الفلورة، وقلل من الانبعاث المتبقي من PE، وقلل من التباين بين الدفعات. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. لذا، يُنصح بتخفيف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. Cy هي علامة تجارية مسجلة لشركة Amersham Biosciences Limited. يُباع هذا المنتج المُقترن بموجب ترخيص من براءات الاختراع الأمريكية التالية: 5,486,616؛ 5,569,587؛ 5,569,766؛ 5,627,027. يخضع هذا المنتج لحقوق الملكية الفكرية لشركة Amersham Biosciences Corp. وجامعة كارنيجي ميلون، ويتم تصنيعه وبيعه بموجب ترخيص من شركة Amersham Biosciences Corp. هذا المنتج مُرخص للبيع لأغراض البحث العلمي فقط، ولا يُرخص لأي استخدام آخر. إذا كنتَ بحاجة إلى ترخيص تجاري لاستخدام هذا المنتج ولم يكن لديك ترخيص، فيُرجى إعادة هذه المادة غير مفتوحة إلى BD Biosciences، 10975 Torreyana Rd، سان دييغو، كاليفورنيا 92121، وسيتم رد أي مبلغ مدفوع مقابلها.