BD، 551058، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد CD83 الفأري البشري

الاسم البديل: BL11؛ HB15؛ بروتين تنشيط الخلايا البائية
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
المستضد: خلايا COS المحولة وراثيًا بـ CD83 البشري
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
رقم الورشة: السادس
RRID: AB_394025
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy5 (المعروف سابقًا باسم BD Cy-Chrome™) في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط و PE-Cy5 الحر.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. PE-Cy5 هو فلوروكروم مزدوج يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بواسطة ضوء 488 نانومتر من ليزر أيون الأرجون ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتتألق عند 670 نانومتر. وقد حسّنت شركة BD Biosciences Pharmingen نقل طاقة الفلوركروم في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من PE، وتقليل التباين بين الدفعات. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون أرجون واحد ينبعث منه ضوء 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع لفلوروكروم PE-Cy5 المزدوج، يجب توخي الحذر عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر التي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: يمكن أن يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. وقد أُفيد أن الفلوركرومات المزدوجة PE-Cy5 ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أُفيد أن PE يرتبط بالخلايا الليمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc. يمكن أن يؤدي تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا مع الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المُنقّى والمُضاد لـ CD16/CD32 للفئران والمُستخلص من Mouse BD Fc Block™ إلى تقليل الارتباط غير النوعي للكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 بالخلايا البائية للفئران. مع ذلك، لا يُنصح باستخدام الكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين الخلايا الطحالية لفئران SJL وNOD وMRL، إذ أُبلغ عن تلوين غير نوعي للخلايا اللمفاوية البائية و/أو أنواع أخرى من الكريات البيضاء بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (حيث يُعتقد أن معقد CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يمكن استخدام الكواشف المقترنة بـ PE وPerCP وPerCP-Cy5.5 وAPC وAPC-Cy7 على الكريات البيضاء من هذه السلالات من الفئران. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يُرجى زيارة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources.