BD، 551129، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد CD49f للفئران البشري

الاسم البديل: ITGA6؛ الجسم المضاد أحادي النسيلة GoH3 للإنترغرين ألفا-6؛ سلسلة الإنترغرين α6؛ VLA-6؛ ITA6
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، الفأر، الخنزير، الكلب (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: فأر SD، المعروف أيضًا باسم سلالة سبريج-داولي (غير متجانسة) IgG2a، κ
المستضد: خلايا ورم الثدي لدى الفئران
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
رقم ورشة العمل: IV P55
RRID: AB_394062
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA ومثبت البروتين و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy5 (المعروف سابقًا باسم BD Cy-Chrome™) في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط و PE-Cy5 الحر.
إجراءات التحليل الموصى بها: يمكن استخدام خرز BD™ CompBeads كبديل لتقييم التداخل الفلوري (التعويض). عند ارتباط الأجسام المضادة المقترنة بالفلوركروم بخرز CompBeads، فإنها تُظهر خصائص طيفية مشابهة جدًا للخلايا. مع ذلك، قد توجد اختلافات طفيفة في الانبعاثات الطيفية لبعض الفلوركرومات مقارنةً بالخلايا، مما يؤدي إلى قيم تداخل تختلف عند مقارنتها بالضوابط البيولوجية. يُنصح بشدة، عند استخدام أي كاشف لأول مرة، بمقارنة التداخل على الخلية وخرز CompBeads للتأكد من ملاءمة خرز BD CompBeads لتطبيقك الخلوي المحدد.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: يمكن أن يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مركب فلوري مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعرض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع لصبغة PE-Cy5 الفلورية المزدوجة، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر التي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. يتكون PE-Cy5 من صبغة فلورية مزدوجة من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بواسطة ضوء 488 نانومتر من ليزر أيون الأرجون ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة عند 670 نانومتر. وقد حسّنت شركة BD Biosciences Pharmingen نقل طاقة الصبغة الفلورية في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من PE، وتقليل التباين بين الدفعات. أُفيد أن صبغات PE-Cy5 المزدوجة ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أُفيد أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc أيضًا. يمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا مع الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المضاد لـ CD16/CD32 للفئران، والمُنقى بواسطة Mouse BD Fc Block™، من الارتباط غير النوعي للكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 بالخلايا البائية للفئران. مع ذلك، لا ينبغي استخدام الكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين الخلايا الطحالية لفئران SJL وNOD وMRL، إذ أُفيد أن الخلايا اللمفاوية البائية و/أو كريات الدم البيضاء الأخرى تتلون بشكل غير نوعي بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (حيث يُعتقد أن معقد CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يمكن استخدام الكواشف المقترنة بصبغات الفلوركروم المزدوجة PE، وPerCP، وPerCP-Cy5.5، وAPC، وAPC-Cy7 على خلايا الدم البيضاء من سلالات الفئران هذه. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يُرجى زيارة http://regdocs.bd.com للاطلاع على صحائف بيانات السلامة (SDS). قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده على جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يُرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.