BD، 551137، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد الفأر CD137 البشري

الاسم البديل: 4-1BB، ILA، TNFRSF9
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1، κ للفأر BALB/c
المستضد: بروتين اندماجي بشري معاد التركيب 4-1BB
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
رقم الورشة: VI C-7
RRID: AB_394067
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy5 (المعروف سابقًا باسم BD Cy-Chrome™) في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy5 الحر.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي ينبعث منه ضوء بطول موجي 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع لصبغة PE-Cy5 المزدوجة، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر التي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. يُعدّ PE-Cy5 فلوروكرومًا مزدوجًا يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بواسطة ضوء ليزر أيون الأرجون بطول موجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة عند 670 نانومتر. وقد حسّنت شركة BD Biosciences Pharmingen نقل طاقة الفلوركروم في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من PE، وتقليل التباين بين الدفعات. وقد أشارت التقارير إلى أن فلوروكرومات PE-Cy5 المزدوجة ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أشارت التقارير إلى أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية في الفئران عبر مستقبلات Fc أيضًا. يمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا باستخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المُنقّى والمُضاد لـ CD16/CD32 للفئران والمُستخلص بواسطة Mouse BD Fc Block™ من الارتباط غير النوعي للكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 بخلايا B للفئران. مع ذلك، لا يُنصح باستخدام الكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين خلايا الطحال لفئران SJL وNOD وMRL، حيث أُبلغ عن تلوين غير نوعي للخلايا اللمفاوية B و/أو كريات الدم البيضاء الأخرى بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (يُعتقد أن مُركب CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يُمكن استخدام الكواشف المُقترنة بـ PE وPerCP وPerCP-Cy5.5 وAPC وAPC-Cy7 على كريات الدم البيضاء من هذه السلالات من الفئران. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة في أي مركب فلوري مزدوج؛ لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المرتبطة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بها، لإضاءة الغرفة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources.