BD، 551219، BD Pharmingen™ مضاد الفئران النقي IL-12 p40/p70

التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1 للفئران
المستضد: بروتين IL-12 p70 الفأري المؤتلف المُعبَّر عنه في خلايا CHO
التطبيق: اختبار ELISA (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 1.0 ملغم/مل
RRID: AB_394097
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي بواسطة كروماتوغرافيا التقارب. يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية.
إجراءات الفحص الموصى بها: فحص ELISA لالتقاط IL-12 p40: يُعدّ الجسم المضاد C15.6 النقيّ مفيدًا كجسم مضاد لالتقاط IL-12 p40 في فحص ELISA الساندويتش، حيث يقيس الكمية الإجمالية لـ p40 في المحلول (مُرتبطًا على شكل ثنائي متجانس أو ثنائي غير متجانس، بالإضافة إلى أحادي حر). يمكن استخدام الجسم المضاد C15.6 النقيّ مع الجسم المضاد C17.8 المُؤشّر بالبيوتين (رقم المنتج 554476) كجسم مضاد للكشف، مع استخدام بروتين IL-12 p70 المُعاد تركيبه من الفأر (رقم المنتج 554592؛ انظر الشكل) أو بروتين IL-12 p40 (رقم المنتج 554594؛ البيانات غير معروضة) كمعيار. يجب معايرة الجسم المضاد C15.6 النقيّ بتركيز 6-10 ميكروغرام/مل لتحديد التركيز الأمثل لالتقاط ILISA. للحصول على منحنيات معايرة خطية، يُوصى بتخفيف بروتين IL-12 الفأري بتراكيز متضاعفة تتراوح من 4000 إلى 30 بيكوغرام/مل في كل صفيحة ELISA. وللحصول على أقصى حساسية، يُوصى بحضانة العينات/المعايير مع الجسم المضاد المُغلف طوال الليل (عند 4 درجات مئوية). ملاحظة: لاختبار IL-12 p40 الفأري في السوائل البيولوجية المعقدة مثل المصل أو البلازما، يُوصى باستخدام مجموعة BD OptEIA™ ELISA لاختبار IL-12 p40 الفأري (رقم المنتج 555165). ولاختبار IL-12 p70 الفأري في المصل أو البلازما، يُوصى باستخدام مجموعة BD OptEIA™ ELISA لاختبار IL-12 p70 الفأري (رقم المنتج 555256). عنصر التحكم في الحجب للتلوين داخل الخلايا: يمكن استخدام الجسم المضاد C15.6 المُنقّى كعنصر تحكم في الحجب لإثبات خصوصية تلوين IL-12 بواسطة C15.6 المُقترن مباشرةً. لإجراء هذه التجربة، يمكن حضانة الخلايا المثبتة/المنفذة (حوالي مليون خلية) مع 1-10 ميكروغرام من الأجسام المضادة C15.6 النقية لمدة 20 دقيقة عند درجة حرارة 4 مئوية، قبل تلوينها باستخدام الأجسام المضادة C15.6 المرتبطة مباشرةً (على سبيل المثال، 0.1-0.5 ميكروغرام من الأجسام المضادة أحادية النسيلة لكل مليون خلية). وصف كل من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية تلوين السيتوكينات داخل الخلايا واستخدام الضوابط الحاجبة بالتفصيل. للاطلاع على المنهجية المحددة، يرجى زيارة موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com، والاطلاع على قسم البروتوكولات أو الفصل الخاص بالتلوين داخل الخلايا وقياس التدفق الخلوي في دليل وظائف المناعة.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي.