BD، 551375، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد الفأر HLA-DR البشري

التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون، الكلب، الأرنب (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG2b الفأري، κ
المستضد: خلايا الدم المحيطية أحادية النواة البشرية وخط الخلايا SL6866
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_394172
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy5 (المعروف سابقًا باسم BD Cy-Chrome™) في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط و PE-Cy5 الحر.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية حجمها 100 ميكرولتر (اختبار). تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. PE-Cy5 هو فلوروكروم مزدوج يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يتم إثارته بواسطة ضوء 488 نانومتر من ليزر أيون الأرجون ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتتألق عند 670 نانومتر. قامت شركة BD Biosciences Pharmingen بتحسين نقل طاقة الفلوركروم في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من PE، وتقليل التباين بين الدفعات. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع للفلوركروم المزدوج PE-Cy5، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر التي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. وقد أشارت التقارير إلى أن فلوركرومات PE-Cy5 المزدوجة ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أشارت التقارير إلى أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc أيضًا. ويمكن تقليل الارتباط غير النوعي للكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 بالخلايا البائية للفئران عن طريق تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا باستخدام Mouse BD Fc Block™، وهو جسم مضاد أحادي النسيلة 2.4G2 مُنقّى من الفأر ضد CD16/CD32. مع ذلك، لا يُنصح باستخدام الكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين الخلايا الطحالية لفئران SJL وNOD وMRL، إذ أُبلغ عن تلوين غير نوعي للخلايا اللمفاوية البائية و/أو أنواع أخرى من الكريات البيضاء بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (حيث يُعتقد أن معقد CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يمكن استخدام الكواشف المقترنة بـ PE وPerCP وPerCP-Cy5.5 وAPC وAPC-Cy7 على الكريات البيضاء من هذه السلالات من الفئران. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.