BD، 552174، BD Pharmingen™ بيوتين مضاد للفئران CCR7 البشري (CD197)

الاسم البديل: CCR7، BLR-2، EBI-1، CMKBR7
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG2a، κ للفئران
المستضد: بروتين CCR7 البشري
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_394352
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالبيوتين في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة البيوتين غير المتفاعل.
إجراءات الفحص الموصى بها: يمكن استخدام الجسم المضاد 3D12 المُؤشَّر بالبيوتين مع كاشف عالي السطوع في الخطوة الثانية، مثل ستربتأفيدين-فيكوإريثرين (رقم المنتج 554061)، للتلوين المناعي الفلوري وتحليلات التدفق الخلوي لخلايا الدم البيضاء البشرية وخطوط الخلايا التي تُعبِّر عن CCR7 (انظر الشكل). لا يمكننا الحصول على نتائج قابلة للتكرار باستخدام كاشف أقل سطوعًا مثل ستربتأفيدين-FITC أو -PerCP مع هذا الجسم المضاد. لذا، لا يُنصح باستخدام ستربتأفيدين-FITC أو -PerCP. التوصية: من المعروف أن مستقبلات الكيموكينات تُستَدخَل إلى داخل الخلايا أثناء المعالجة، مما يؤدي إلى انخفاض تردد التعبير. يجب إجراء دراسات النمط الظاهري المناعي لمستقبلات الكيموكينات على دم كامل طازج (أقل من 24 ساعة). يجب إجراء الحضانة مع الجسم المضاد في الظلام. أظهرت الدراسات أن المعالجة الخلوية، مثل فصل الخلايا باستخدام الفيكول، أو تجميدها، أو تعريضها لدرجات حرارة منخفضة قبل التلوين، تؤدي إلى انخفاض شدة التلوين ونتائج غير متسقة. لذا، يُنصح بشدة باتباع إجراء تلوين متعدد الخطوات لتعزيز إشارات التألق المناعي في تحليل التعبير عن مستقبل CCR7 البشري باستخدام قياس التدفق الخلوي. ويُوصى باستخدام جسم مضاد نقي من الفئران ضد CD197 البشري (CCR7) (رقم المنتج 552175) وإجراء تلوين من ثلاث خطوات للكشف عن التعبير المنخفض التردد.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources.