BD، 552311، مغناطيس فصل الخلايا BD IMag™

التطبيق: فصل الخلايا (يتم اختباره بشكل روتيني)
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
RRID: AB_2868958
الوصف: جهاز فصل الخلايا المغناطيسي BD IMag™ عبارة عن حامل أنابيب اختبار بلاستيكي متخصص يحيط بمغناطيس أرضي نادر دائم قوي. يتسع لستة أنابيب اختبار ذات قاع مستدير بأبعاد 12 × 75 مم أو أنبوبين بأبعاد 17 × 100 مم في الوضع الأمثل للفصل المغناطيسي لكريات الدم البيضاء الموسومة بجزيئات BD IMag™ - DM. عند وضع الأنابيب التي تحتوي على معلقات خلايا موسومة بـ BD IMag™ في جهاز فصل الخلايا المغناطيسي، يجذب المجال المغناطيسي الخلايا الموسومة إلى الجدران المجاورة للأنابيب، مما يسمح بإزالة السائل الطافي الذي يحتوي على أي خلايا غير موسومة. عند إزالة الأنابيب لاحقًا من جهاز فصل الخلايا المغناطيسي، يمكن جمع الخلايا الموسومة. يتيح هذا النظام البسيط اختيارًا سريعًا وفعالًا، إيجابيًا أو سلبيًا، لمجموعات كريات الدم البيضاء المطلوبة. يحتوي جهاز فصل الخلايا المغناطيسي على مغناطيس دائم قوي قد يؤثر على الأجهزة الدقيقة والمعدات الإلكترونية وأجهزة التسجيل المغناطيسي أو يتسبب في تلفها. لذا، يجب على الأشخاص الذين يرتدون أجهزة تنظيم ضربات القلب عدم لمس مغناطيس فصل الخلايا، كما يجب عدم وضع مغناطيس فصل الخلايا بالقرب من أدوات المختبر، أو الشاشات، أو أقراص الكمبيوتر، أو بطاقات الائتمان، أو أشرطة الفيديو أو الصوت، أو الساعات. يتميز مغناطيس فصل الخلايا بجاذبية قوية جدًا للمعادن الحديدية، لذا يجب عدم وضعه على أسطح فولاذية أو بالقرب من أجسام تحتوي على الفولاذ أو الحديد. ومثل جميع الأدوات الدقيقة التي تحتوي على البلاستيك، قد يتعرض مغناطيس فصل الخلايا للتشوه أو التلف نتيجة التعرض للحرارة الزائدة أو الأشعة فوق البنفسجية. في حال الحاجة إلى تعقيمه، يمكن مسحه بمحلول كحولي أو مبيض. لا تقم بغلي مغناطيس فصل الخلايا، أو تعقيمه بالبخار، أو تعريضه للأشعة فوق البنفسجية الاصطناعية.
إجراءات الفحص الموصى بها: تُعد جزيئات BD IMag™ - DM مثالية للاستخدام مع مغناطيس فصل الخلايا. مرفق بروتوكول مفصل للاختيار الإيجابي والسلبي. لا يُنصح باستخدام جزيئات BD IMag™ - MSC. للاختيار السلبي لمجموعات فرعية من الكريات البيضاء، تُستخدم الأجسام المضادة لتحديد مجموعة (مجموعات) الخلايا غير المرغوب فيها. تُستخدم جزيئات BD IMag™ - DM المقترنة بالأجسام المضادة أو جزيئات BD IMag™ - DM المُرتبطة بالبيوتين مع الستربتافيدين لتحديد معلق الخلايا، ثم تُعلق الخلايا المحددة في محلول BD IMag™ بتركيز 1X. بعد ذلك، توضع الأنابيب التي تحتوي على الخلايا المحددة في مغناطيس فصل الخلايا، حيث تنجذب الخلايا المحددة إلى المغناطيس، بينما تبقى الخلايا المرغوبة معلقة في السائل الطافي. يُجمع السائل الطافي بعد وضع الأنابيب في مغناطيس فصل الخلايا للحصول على مجموعة الكريات البيضاء المطلوبة. لاختيار مجموعات فرعية من الكريات البيضاء، تُستخدم الأجسام المضادة لتحديد نوع الخلايا المطلوبة. تُستخدم جزيئات BD IMag™ المرتبطة بالأجسام المضادة -DM أو جزيئات BD IMag™ المرتبطة بالأجسام المضادة والستربتافيدين -DM لتحديد الخلايا المعلقة، ثم تُعلق الخلايا المحددة في محلول BD IMag™ بتركيز 1X. بعد ذلك، توضع الأنابيب التي تحتوي على الخلايا المحددة في جهاز فصل الخلايا المغناطيسي، حيث تنجذب الخلايا المطلوبة إلى المغناطيس. يُزال السائل الطافي للتخلص من الكريات البيضاء غير المرغوب فيها. ثم يُزال الأنبوب من جهاز فصل الخلايا المغناطيسي لفصل الخلايا المطلوبة. بروتوكول فصل الخلايا المغناطيسي: هذا البروتوكول مناسب لفصل معلقات الخلايا المفردة التي تتراوح أعدادها بين 1 × 10⁷ و2 × 10⁸ خلية بيضاء في حجم يتراوح بين 0.5 و10 مل. ١. ضع علامات مناسبة على أزواج الأنابيب لجمع الأجزاء الموجبة والسالبة، ثم ضعها على الثلج. خفف محلول BD IMag™ (10X) (رقم المنتج 552362) بنسبة 1:10 باستخدام ماء مقطر معقم، أو حضّر محلول BD IMag™ بتركيز 1X من الصفر (محلول ملحي مُخفّف بالفوسفات، 0.5% BSA، 2 مليمول EDTA، و0.09% أزيد الصوديوم)، ثم ضعه على الثلج. يجب تنفيذ الخطوات من 2 إلى 5 لكل من الاختيار الموجب والسالب. ٢. بعد وسم الخلايا بجزيئات BD IMag™ - DM، اضبط تركيز الخلايا إلى 2 × 10⁷ خلية/مل باستخدام محلول BD IMag™ البارد بتركيز 1X. 3. انقل معلق الخلايا الموسومة بـ BD IMag™ إلى أنبوب (أنابيب) تجميع الجزء الموجب: - أنبوب 12 × 75 مم: الحد الأدنى للحجم 0.5 مل والحد الأقصى 3.5 مل - أنبوب 17 × 100 مم: الحد الأدنى للحجم 3.0 مل والحد الأقصى 10 مل. 4. ضع أنبوب (أنابيب) الجزء الموجب في حامل (حاملات) الأنابيب المناسب على مغناطيس فصل الخلايا: - أنبوب 12 × 75 مم: اتركه على مغناطيس فصل الخلايا لمدة 6 دقائق - أنبوب 17 × 100 مم: اتركه على مغناطيس فصل الخلايا لمدة 10 دقائق. 5. مع بقاء أنبوب (أنابيب) الجزء الموجب على مغناطيس فصل الخلايا، أزل السائل الطافي (الجزء السالب) باستخدام ماصة باستور زجاجية، وانقل الجزء السالب إلى أنبوب (أنابيب) الجزء السالب. بذلك يكون فصل الخلايا السالب قد اكتمل. إذا رغبتَ في إجراء عملية انتقاء إيجابي، فانتقل إلى الخطوة 6. إذا لم ترغب في ذلك، فانتقل مباشرةً إلى الخطوة 11. 6. أزل أنبوب (أنابيب) الجزء الموجب من مغناطيس فصل الخلايا، وضعها على الثلج. لمزيد من تنقية الجزء الموجب، نوصي بإضافة الخطوات من 7 إلى 10. 7. أضف 1 مل من محلول BD IMag™ البارد بتركيز 1X إلى كل أنبوب من أنابيب الجزء الموجب. أعد تعليق الخلايا عن طريق السحب اللطيف بالماصة أو الخلط باستخدام جهاز الخلط الدوامي. أعد وضع الأنبوب (الأنابيب) على مغناطيس فصل الخلايا. - أنبوب 12 × 75 مم: اتركه على مغناطيس فصل الخلايا لمدة دقيقتين. - أنبوب 17 × 100 مم: اتركه على مغناطيس فصل الخلايا لمدة 5 دقائق. 8. باستخدام ماصة باستور زجاجية جديدة، أزل السائل الطافي وتخلص منه. 9. كرر الخطوات 6 و7 و8 مرة أخرى. 10. أزل أنبوب (أنابيب) الجزء الموجب من مغناطيس فصل الخلايا وضعها على الثلج. أضف 1 مل من محلول BD IMag™ البارد بتركيز 1X إلى كل أنبوب من أنابيب الجزء الموجب. أعد تعليق الخلايا عن طريق السحب اللطيف بالماصة أو الخلط باستخدام جهاز الخلط الدوامي. بذلك تكون عملية فصل الخلايا الموجبة قد اكتملت. 11. يمكن الآن إعادة تعليق الأجزاء الموجبة والسالبة في محاليل مناسبة لاستخدامها في تطبيقات لاحقة، بما في ذلك قياس التدفق الخلوي.
إشعارات المنتج: يرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تُحضّر جزيئات BD IMag™ من جزيئات مغناطيسية مُعدّلة بمجموعات الكربوكسيل، وهي من إنتاج شركة Skold Technology ومرخصة بموجب براءة الاختراع الأمريكية رقم 7,169,618.