BD، 552536، BD Pharmingen™ بيوتين مضاد للفئران CD120a البشري

الاسم البديل: مستقبل عامل نخر الورم من النوع الأول؛ TNFR1؛ TNFR55؛ TNFR60؛ TNFRSF1A
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG2a، κ للفأر BALB/c
المستضد: بروتين CD120a البشري المؤتلف
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)، الكشف باستخدام مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (يتم اختباره أثناء التطوير)
التركيز: 0.5 ملغم/مل
RRID: AB_393945
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالبيوتين في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة البيوتين غير المتفاعل.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يمكن استخدام الأجسام المضادة للفأر البيوتينية المضادة لـ CD120a البشري (رقم المنتج 550900) للتلوين المناعي الفلوري (≤ 1 ميكروغرام من الأجسام المضادة/10×6 خلايا) وتحليل التدفق الخلوي للخلايا البشرية ذات النواة لقياس مستويات التعبير عن TNFRI على سطحها. يُوصى باتباع بروتوكول تلوين ثنائي الطبقات لزيادة الكشف عن TNFRI المُعبر عنه في الخلايا، كما هو موضح بالتفصيل في شرح الشكل. ولإثبات الخصوصية، يتم تثبيط ارتباط MABTNFR1-B1 بـ TNFRI عند تحضين الخلايا المستهدفة البشرية TNFRI+ مسبقًا مع مستويات مشبعة من TNF البشري المؤتلف عند 4 درجات مئوية، أي عندما يكون TNFRI مرتبطًا بالرابط. استنادًا إلى بياناتنا، يكفي مستوى TNF البشري المؤتلف الذي يزيد عن 50 نانوغرام/10×6 خلايا لتثبيط ارتباط MABTNFR1-B1 (0.06 ميكروغرام/10×6 خلايا) بشكل كامل. يُرجى ملاحظة أنه نتيجةً للتنشيط في الجسم الحي أو في المختبر، قد تُفرز الخلايا مستقبلات TNFRI على سطحها أو قد تُعبّر عنها الخلايا بشكل عابر بمستويات أعلى. وبالتالي، قد يؤثر تنشيط الخلايا على مستوى التعبير الكلي لمستقبلات TNFRI على سطحها. الكشف بتقنية ELISA: يُستخدم الجسم المضاد Biotin Mouse Anti-Human CD120a كجسم مضاد للكشف في اختبار ELISA الساندويتش لقياس مستويات بروتين TNFRI البشري الذائب. يمكن استخدام الجسم المضاد Biotin Mouse Anti-Human CD120a مع الجسم المضاد Purified Mouse Anti-Human CD120a (رقم المنتج 552535) باستخدام TNFRI البشري الذائب المؤتلف كمعيار. يجب معايرة هذا الجسم المضاد للكشف بتركيز يتراوح بين 0.5 و1 ميكروغرام/مل لتحديد تركيزه الأمثل للكشف بتقنية ELISA. وللحصول على منحنيات معايرة خطية، يُوصى بتخفيفات مضاعفة من بروتين TNFRI البشري القابل للذوبان والمُعاد تركيبه، بتركيز يتراوح بين 200 و15 بيكوغرام/مل، لإضافتها إلى كل صفيحة ELISA. للاطلاع على المنهجية التفصيلية، يُرجى زيارة قسم البروتوكولات ضمن "ELISA وELISPOT" على موقعنا الإلكتروني: http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يرجى زيارة http://regdocs.bd.com للاطلاع على صحائف بيانات السلامة (SDS). يرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.