BD، 552596، BD Pharmingen™ مضاد PARP النقي للفأر (Asp214)

التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
التطبيق: لطخة ويسترن (يتم اختبارها بشكل روتيني)، الترسيب المناعي، التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختبارها أثناء التطوير)
معرف جين Entrez: 142، 11545
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
الوصف: إنزيم PARP (بوليميراز عديد [ADP-ريبوز]) هو إنزيم نووي مرتبط بالكروماتين، يبلغ وزنه الجزيئي 113 كيلو دالتون، ويحفز نقل وحدات ADP-ريبوز من NAD+ إلى مجموعة متنوعة من البروتينات النووية، بما في ذلك إنزيمات التوبويزوميراز، والهيستونات، وPARP نفسه. يزداد النشاط التحفيزي لـPARP في الخلايا بعد تلف الحمض النووي، ويُعتقد أن PARP يلعب دورًا هامًا في التوسط في الاستجابة الخلوية الطبيعية لتلف الحمض النووي. بالإضافة إلى ذلك، يُعد PARP هدفًا لنشاط بروتياز الكاسبيز المرتبط بالاستماتة الخلوية. يتكون بروتين PARP من نطاق ارتباط بالحمض النووي (DBD) في الطرف الأميني، ونطاق تحفيزي في الطرف الكربوكسيلي، يفصل بينهما نطاق تعديل ذاتي مركزي. أثناء الاستماتة الخلوية، يقوم الكاسبيز-3 بقطع PARP عند موقع التعرف (Asp Glu Val Asp Gly) في نطاق DBD لتكوين شظايا بوزن جزيئي 24 و89 كيلو دالتون. تفصل هذه العملية نطاق ربط الحمض النووي (DBD) (الموجود في الغالب ضمن الجزء ذي الوزن الجزيئي 24 كيلو دالتون) عن النطاق التحفيزي (الموجود ضمن الجزء ذي الوزن الجزيئي 89 كيلو دالتون) للإنزيم، مما يؤدي إلى فقدان وظيفة PARP الطبيعية. وقد اقتُرح أن تعطيل PARP يوجه الخلايا المتضررة من الحمض النووي إلى الخضوع للاستماتة الخلوية المبرمجة (الموت المبرمج) بدلاً من التحلل النخري، ويُعتبر وجود جزء انقسام PARP ذي الوزن الجزيئي 89 كيلو دالتون مؤشرًا على الاستماتة الخلوية المبرمجة. استُخدم ببتيد مطابق للنهاية الأمينية لموقع الانقسام (Asp 214) لـ PARP البشري كمستضد. يتفاعل الجسم المضاد أحادي النسيلة F21-852 فقط مع الجزء ذي الوزن الجزيئي 89 كيلو دالتون من PARP-1 البشري، والذي يقع أسفل موقع انقسام كاسبيز-3 (Asp214) ويحتوي على نطاقي التعديل الذاتي والتحفيزي. ولا يتفاعل مع PARP-1 البشري السليم. لا يُعرف مدى التفاعل المتبادل مع أعضاء آخرين من عائلة PARP الفائقة. وقد ثبت التعرف على PARP المنشطر في خلايا الفئران، وقد يتفاعل أيضًا مع عدد من الأنواع الأخرى نظرًا لطبيعة الجزيء المحفوظة.
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. يُحفظ الجسم المضاد، المكون رقم 51-9000017، عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. يُحفظ المستخلص الخلوي، المكون رقم 51-16606N، عند درجة حرارة -20 درجة مئوية.
إجراءات التحليل الموصى بها: يُقدَّم مستخلص خلايا جركات المعالج بالكامبتوثيسين [50 ميكروغرام (1 ميكروغرام/ميكرولتر)] كعينة تحكم موجبة (51-16606N؛ يُحفظ المستخلص عند -20 درجة مئوية). يتوفر مستخلص جركات إضافي غير معالج (رقم المنتج 611451) أو كمجموعة تحتوي على مستخلصات غير معالجة وأخرى معالجة بالكامبتوثيسين (رقم المنتج 550959) كعينات تحكم جاهزة للاستخدام في تحليل ويسترن بلوت. تشمل التطبيقات الإضافية التي لا تُجرى عليها اختبارات روتينية في شركة BD Biosciences Pharmingen الترسيب المناعي (2 ميكروغرام/300 ميكروغرام من المستخلصات) وقياس التدفق الخلوي. يُوصى باستخدام الأشكال المُقترنة مباشرةً من المستنسخ لقياس التدفق الخلوي (رقم المنتج 552933، يُرجى الاستفسار).
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.
الوصف: الكمية/الحجم: رقم القطعة: معرف EntrezGene
غير متوفر : 50.0 : غير متوفر : غير متوفر