BD، 552932، معيار السيتوكين الالتهابي البشري المجفف بالتجميد من BD™، مصفوفة الخرزات الخلوية (CBA)

التحضير والتخزين: يُحفظ المعيار المجفف بالتجميد عند درجة حرارة 4 درجات مئوية قبل إعادة تكوينه. تُقارب الكريات المجففة بالتجميد من قارورة واحدة من معيار السيتوكينات الالتهابية البشرية، عند إعادة تكوينها في 2.0 مل من مخفف الفحص، نشاط اختبار CBA للإنترلوكين البشري (IL)-8، وIL-1β، وIL-6، وIL-10، وعامل نخر الورم (TNF)، وIL-12p70 بتركيز 5000 بيكوغرام/مل. بعد إعادة التكوين، يُحفظ معيار السيتوكينات الالتهابية البشرية عند درجة حرارة 4 درجات مئوية ويُستخدم خلال 12 ساعة. يجب التخلص من أي معيار مُعاد تكوينه غير مستخدم بعد هذه المدة (لا يُخزن أو يُعاد استخدامه).
إجراءات التحليل الموصى بها: تم اختبار معيار السيتوكين الالتهابي البشري باستخدام مجموعة BD™ CBA Human Inflammatory Cytokine Kit (رقم المنتج 551811) لضمان كميات البروتين ووظيفته في تحليل BD™ CBA. يُنصح الباحثون بالرجوع إلى دليل مجموعة CBA أو إلى التعليمات المختصرة أدناه (بروتوكول تحضير معيار السيتوكين الالتهابي البشري). يجب إعادة تكوين معيار السيتوكين الالتهابي البشري باستخدام مخفف التحليل المرفق مع مجموعات CBA المذكورة أعلاه (رقم المكون 51-2432KC) أو يمكن شراؤه بشكل منفصل (رقم المنتج 560104). تحضير معيار السيتوكين الالتهابي البشري: معيار السيتوكين الالتهابي البشري مجفف بالتجميد، ويجب إعادة تكوينه وتخفيفه بشكل متسلسل قبل مزجه مع خرزات التقاط CBA وكواشف الكشف PE. ١. افتح قارورة واحدة من معيار السيتوكين الالتهابي البشري المجفف بالتجميد. انقل جميع الكريات المجففة إلى أنبوب بولي بروبيلين (BD Falcon™، رقم المنتج 352097). ضع ملصق "المعيار الأعلى" على الأنبوب. ٢. أعد تكوين المعيار بإضافة 2.0 مل من مخفف المعايرة. اترك المعيار المُعاد تكوينه ليتوازن لمدة 15 دقيقة على الأقل قبل إجراء التخفيفات. امزج البروتين المُعاد تكوينه باستخدام ماصة فقط. تجنب الخلط بقوة أو استخدام جهاز الخلط الدوامي. ٣. ضع ملصقات على 12 أنبوبًا إضافيًا بحجم 75 مم (BD Falcon™، رقم المنتج 352008) ورتبها بالترتيب التالي: المعيار الأعلى، 1:2، 1:4، 1:8، 1:16، 1:32، 1:64، 1:128، و1:256. ٤. أضف ٣٠٠ ميكرولتر من مخفف المعايرة إلى كل أنبوب من أنابيب التخفيف. ٥. قم بإجراء تخفيف متسلسل بنقل ٣٠٠ ميكرولتر من المحلول القياسي العلوي إلى أنبوب التخفيف ١:٢ واخلط جيدًا. لا تستخدم جهاز الخلط الدوامي، بل اخلط باستخدام الماصة فقط. استمر في إجراء التخفيفات المتسلسلة بنقل ٣٠٠ ميكرولتر من أنبوب ١:٢ إلى أنبوب ١:٤ وهكذا حتى أنبوب ١:٢٥٦ واخلط جيدًا. جهّز أنبوبًا واحدًا يحتوي على مخفف المعايرة فقط ليكون بمثابة عينة التحكم السلبية بتركيز ٠ بيكوغرام/مل.
إشعارات المنتج: ProClin هي علامة تجارية لشركة Rohm and Haas. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تحذير: يحتوي معيار CBA المجفف بالتجميد على 0.02% (وزن/وزن)، ويحتوي كاشف الكشف (الجزء أ) على 0.002% (وزن/وزن) من خليط CMIT/MIT (3:1)، وهو خليط من: 5-كلورو-2-ميثيل-4-أيزوثيازولين-3-ون [رقم EC 247-500-7] و2-ميثيل-4-أيزوثيازولين-3-ون [رقم EC 220-239-6] (3:1). بيان المخاطر: قد يُسبب رد فعل تحسسي جلدي. بيانات الاحتياطات: لا يُسمح بإخراج ملابس العمل الملوثة من مكان العمل. ارتدِ قفازات واقية/واقي للعينين/واقي للوجه. ارتدِ ملابس واقية. تجنب استنشاق الرذاذ/الأبخرة/البخاخ. في حال حدوث تهيج أو طفح جلدي: استشر طبيباً. في حال ملامسة الجلد: اغسل جيداً بالماء. انزع الملابس الملوثة واغسلها قبل إعادة استخدامها. تخلص من المحتويات/العبوة وفقاً للوائح المحلية/الإقليمية/الوطنية/الدولية.