BD، 554386، BD Pharmingen™ مضاد IL-4 نقي للفئران

التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG2b للفئران
المستضد: إنترلوكين-4 الفأري المؤتلف
التطبيقات: التقاط ELISA، قياس التدفق الخلوي/الحجب داخل الخلايا (يتم اختباره بشكل روتيني)، التحييد (يتم اختباره أثناء التطوير)، لطخة ويسترن (تم الإبلاغ عنها)
التركيز: 0.5 ملغم/مل
RRID: AB_398544
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي بواسطة كروماتوغرافيا التقارب. يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية.
إجراءات الفحص الموصى بها: 1. عنصر التحكم في الحجب للتلوين داخل الخلايا: يمكن استخدام الجسم المضاد BVD4-1D11 النقي (رقم المنتج 554386) كعنصر تحكم في الحجب لإثبات خصوصية تلوين IL-4 بواسطة الجسم المضاد BVD4-1D11 المقترن. لإجراء هذا التحكم، يمكن حضانة الخلايا المثبتة/المنفذة (حوالي مليون خلية) مع 1-10 ميكروغرام من الجسم المضاد BVD4-1D11 غير الموسوم (رقم المنتج 554386) لمدة 20 دقيقة عند 4 درجات مئوية، قبل التلوين بالجسم المضاد BVD4-1D11 المقترن (على سبيل المثال، 0.1-0.5 ميكروغرام من الجسم المضاد أحادي النسيلة لكل مليون خلية). تم وصف تقنية تلوين السيتوكينات داخل الخلايا واستخدام عناصر التحكم في الحجب بالتفصيل من قبل سي. بروسين ودي. ميتكالف. للاطلاع على المنهجية المحددة، يُرجى زيارة موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com، والاطلاع على قسم البروتوكولات أو فصل التلوين داخل الخلايا في دليل وظائف المناعة. ٢. التقاط ELISA: يُعدّ الجسم المضاد BVD4-1D11 النقي (رقم المنتج 554387) مفيدًا كجسم مضاد لالتقاط بروتين IL-4 في اختبار ELISA الساندويتش لقياس مستويات بروتين IL-4 في مستخلصات مزارع الأنسجة لدى الفئران. يمكن استخدام هذا الجسم المضاد مع الجسم المضاد BVD6-24G2 المُؤشَّر بالبيوتين (رقم المنتج 554390) وبروتين IL-4 المُعاد تركيبه (رقم المنتج 550067) كمعيار. للكشف عن IL-4 في المصل أو البلازما، يُوصى باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Mouse IL-4 ELISA (رقم المنتج 555232). ملاحظة: وُجد أن الأجسام المضادة BVD4-1D11 النقية تُنتج خلفية أعلى في اختبار ELISA مقارنةً بالأجسام المضادة البديلة المستخدمة في اختبار ELISA لبروتين IL-4 في الفئران، وهي السلالة 11B11 (رقم المنتج 554434). وللتغلب على هذه الخلفية العالية، يُوصى باتباع الإجراءات التالية الخاصة بالسلالة BVD4-1D11: 1) معايرة الأجسام المضادة BVD4-1D11 (1-4 ميكروغرام/مل) مقابل الأجسام المضادة BVD6-24G2 المُؤشَّرة بالبيوتين (0.1-1.0 ميكروغرام/مل؛ أي أقل من تركيز الأجسام المضادة المُستخدمة للكشف). يجب استخدام عينات تحكم سلبية منفصلة لكل تركيز من الأجسام المضادة المُؤشَّرة بالبيوتين. 2) استخدام ضعف عدد مرات الغسل الموصى بها في جميع خطوات بروتوكول ELISA. 3. التحييد: يُستخدم الجسم المضاد NA/LE™ BVD4-1D11 (رقم المنتج 554385) لتحييد النشاط الحيوي لإنترلوكين-4 في الفئران. 4. التلطيخ الغربي: أُفيد بأن الجسم المضاد BVD4-1D11 مفيد في التلطيخ الغربي. يُرجى العلم بأن هذا التطبيق لا يُختبر بشكل روتيني في شركة BD Biosciences Pharmingen.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي.