BD، 554586، BD Pharmingen™ فأر معاد التركيب GM-CSF

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة المنتج المجمّد، يُقسّم عامل تحفيز مستعمرات المحببات والبلعميات المُعاد تركيبه من الفئران (رقم المنتج 554586) إلى حصص صغيرة في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين، ويُجمّد عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامه لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم معقم متعادل يحتوي على ما لا يقل عن 0.5 - 10 ملغم/مل من بروتين حامل، مثل ألبومين بشري أو بقري، ثم يُقسّم إلى حصص صغيرة ويُخزّن عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. للاستخدام في التحليلات البيولوجية المخبرية، يُوصى بتركيز بروتين حامل يتراوح بين 0.5 و1 ملغم/مل. أما للاستخدام كمعيار في اختبار ELISA، فيُوصى بتركيز بروتين حامل يتراوح بين 5 و10 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان الفعالية. يجب عدم تخفيف هذا المنتج إلى أقل من 5 ميكروغرام/مل للتخزين طويل الأمد. ينبغي فحص البروتينات الحاملة مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد تؤثر البروتينات الحاملة سلبًا على نتائج التجارب نظرًا لسميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية فيها، أو احتمالية تثبيطها. معيار ELISA: يُمكن استخدام بروتين GM-CSF المُعاد تركيبه من الفئران (رقم المنتج 554586) كمعيار كمي لقياس مستويات بروتين GM-CSF في الفئران باستخدام مقايسة ELISA الساندويتشية، وذلك باستخدام الجسم المضاد MP1-22E9 المُنقّى (رقم المنتج 554404) كجسم مضاد لالتقاط البروتين، والجسم المضاد MP1-31G6 المُؤشّر بالبيوتين (رقم المنتج 554407) كجسم مضاد للكشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، يُنصح الباحثون باستخدام تخفيفات مُضاعفة من معيار GM-CSF المُعاد تركيبه من الفئران، بتراكيز تتراوح بين 2000 و15 بيكوغرام/مل، لإضافتها إلى كل صفيحة ELISA. لقياس مستوى عامل تحفيز مستعمرات المحببات والبلعميات (GM-CSF) في مصل أو بلازما الفئران، يُنصح الباحثون بشدة باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Mouse GM-CSF ELISA (رقم المنتج 555167). فيما يخص التحليل الحيوي، يُنصح الباحثون بأن تطبيق التحليل الحيوي لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة، ويُنصح بشدة بمعايرة هذه المادة وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. وقد سُجل سابقًا نطاق نشاط يتراوح بين 0.25 و 5.0 × 10^9 وحدة/ملغ، يشمل قيمة ED50 تتراوح بين 2 و 35 بيكوغرام/مل، باستخدام خلايا MC/9 كخلايا مؤشرة للتكاثر، حيث تُعرف الوحدة بأنها كمية المادة اللازمة لتحفيز استجابة نصف قصوى عند تشبع السيتوكينات. الحجب: يمكن استخدام عامل تحفيز مستعمرات المحببات والبلاعم المُعاد تركيبه من الفئران (رقم المنتج 554586) كعنصر تحكم في الحجب لتحليل التدفق الخلوي عند استخدامه مع الجسم المضاد MP1-22E9 المُقترن بـ PE (رقم المنتج 554406). يُنصح الباحثون بأن تطبيق الحجب لا يُختبر بشكل روتيني لهذا المنتج. وقد وصف كل من سي. بروسين ودي. ميتكالف بالتفصيل تقنيات تلوين السيتوكينات داخل الخلايا واستخدام عناصر التحكم في الحجب.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة.