BD، 554611، BD Pharmingen™ إنترلوكين-10 بشري مُعاد التركيب

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة المنتج لأول مرة، يُقسّم إلى حصص في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين ويُجمّد عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامه لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم معقم متعادل يحتوي على ما لا يقل عن 0.5 - 10 ملغم/مل من بروتين حامل، مثل ألبومين بشري أو بقري، ثم يُقسّم إلى حصص ويُخزّن عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. للاستخدام في التحليلات البيولوجية المخبرية، يُوصى بتركيزات بروتين حامل ≥ 1 ملغم/مل. للاستخدام كمعيار في اختبار ELISA، يُوصى بتركيزات بروتين حامل تتراوح بين 5 و10 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان الفعالية. يجب عدم تخفيف المنتج إلى أقل من 50 ميكروغرام/مل للتخزين طويل الأمد. ينبغي فحص البروتينات الحاملة مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد تؤثر البروتينات الحاملة سلبًا على نتائج التجارب نظرًا لسميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية فيها، أو احتمالية تثبيطها. معيار ELISA: يُعدّ الإنترلوكين-10 البشري المؤتلف (رقم المنتج 554611) معيارًا كميًا مفيدًا لقياس مستويات بروتين الإنترلوكين-10 البشري في اختبار ELISA ساندويتش خاص بالإنترلوكين-10، حيث يُستخدم جسم مضاد مُنقّى من الفئران ضد الإنترلوكين-10 البشري (رقم المنتج 554705) كجسم مضاد لالتقاط البروتين، وجسم مضاد بيوتين ضد الإنترلوكين-10 البشري والفيروسي (رقم المنتج 554499) كجسم مضاد للكشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، يُنصح الباحثون باستخدام تخفيفات مضاعفة من معيار الإنترلوكين-10 البشري المؤتلف بتراكيز تتراوح بين 2000 و15 بيكوغرام/مل، تُضاف إلى كل صفيحة ELISA. لقياس مستوى إنترلوكين-10 البشري في المصل أو البلازما، يُنصح الباحثون بشدة باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Human IL-10 ELISA (رقم المنتج 555157) ومجموعة BD OptEIA™ Human IL-10 ELISA (رقم المنتج 550613). فيما يخص التحليل البيولوجي، يُنصح الباحثون بأن تطبيق التحليل البيولوجي لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة، ويُنصح بشدة بمعايرة هذه المادة وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. وقد سُجّل سابقًا نطاق نشاط يتراوح بين 0.5 و3.3 × 10^7 وحدة/ملغ، يشمل قيمة ED50 تتراوح بين 0.3 و2 نانوغرام/مل، باستخدام خلايا MC/9 كمؤشر للتكاثر، حيث تُعرّف الوحدة بأنها كمية المادة اللازمة لتحفيز استجابة نصف قصوى عند تشبع السيتوكين. الحجب: يمكن استخدام الإنترلوكين-10 البشري المؤتلف (رقم المنتج 554611) كعنصر تحكم حجب في تحليل التدفق الخلوي عند استخدامه مع الأجسام المضادة المقترنة بصبغات فلورية، مثل JES3-9D7 المقترن بـ PE (رقم المنتج 554498). يُنصح الباحثون بعدم إجراء اختبار الحجب بشكل روتيني لهذا المنتج. وقد وصف كل من سي. بروسين ودي. ميتكالف بالتفصيل تقنيات تلوين السيتوكينات داخل الخلايا واستخدام عناصر التحكم في الحجب.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.