BD، 554613، BD Pharmingen™ IL-12 البشري المؤتلف (p70)

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة المنتج، يُقسّم بروتين IL-12 p70 البشري المؤتلف (رقم المنتج 554613) إلى حصص صغيرة في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين، ويُجمّد عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامه لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم معقم متعادل يحتوي على ما لا يقل عن 0.5 - 10 ملغم/مل من بروتين حامل، مثل الألبومين البشري أو البقري، ثم يُقسّم إلى حصص صغيرة ويُخزّن عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. يُوصى باستخدام تركيزات بروتين حامل تتراوح بين 0.5 و1 ملغم/مل في التحليلات البيولوجية المخبرية. أما عند استخدامه كمعيار في اختبار ELISA، فيُوصى باستخدام تركيزات بروتين حامل تتراوح بين 5 و10 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان فعالية المنتج. يجب عدم تخفيف المنتج إلى أقل من 25 ميكروغرام/مل للتخزين طويل الأمد. ينبغي فحص البروتينات الحاملة مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد يكون للبروتينات الحاملة تأثير غير مرغوب فيه على نتائج التجارب بسبب سميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية، أو نشاطها المُثبِّط المحتمل. معيار ELISA: يمكن استخدام بروتين IL-12 p70 البشري المُعاد تركيبه (رقم المنتج 554613) كمعيار كمي لقياس مستويات بروتين IL-12 البشري باستخدام مقايسة ELISA الساندويتشية، وذلك باستخدام الجسم المضاد 20C2 المُنقّى (رقم المنتج 555065) كجسم مضاد مُلتقط، والجسم المضاد C8.6 المُؤشَّر بالبيوتين (رقم المنتج 554660) كجسم مضاد كاشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، قد يرغب الباحثون في استخدام تخفيفات مُضاعفة من بروتين IL-12 البشري المُعاد تركيبه، تتراوح من 2000 إلى 15 بيكوغرام/مل، لتُضاف إلى كل صفيحة ELISA. لقياس مستوى إنترلوكين-12 البشري في المصل أو البلازما، يُنصح الباحثون بشدة باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Human IL-12 ELISA (رقم المنتج 555171 لإنترلوكين-12 البشري p40 ورقم المنتج 555183 لإنترلوكين-12 البشري p70) أو مجموعة BD OptEIA™ Human IL-12 ELISA Kit II (رقم المنتج 551116 لإنترلوكين-12 البشري p40 ورقم المنتج 559258 لإنترلوكين-12 البشري p70). فيما يخص التحليل البيولوجي: يُنصح الباحثون بأن تطبيق التحليل البيولوجي لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة، ويُنصح بشدة بمعايرة هذه المادة وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. تم الإبلاغ سابقًا عن نطاق نشاط يتراوح من 0.2 إلى 5.0 × 10^8 وحدة/ملغ، يشمل ED50 = 20 - 500 بيكوغرام/مل، باستخدام خلايا الدم المحيطية أحادية النواة البشرية المنشطة بواسطة PHA/IL-2 للتكاثر، مع تعريف الوحدة على أنها كمية المادة اللازمة لتحفيز استجابة نصف قصوى عند تشبع السيتوكين.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.