BD، 554706، BD Pharmingen™ PE Rat Anti-Human IL-10

الاسم البديل: إنترلوكين-10؛ عامل تثبيط تخليق السيتوكينات؛ عامل تثبيط تخليق السيتوكينات؛ الحمد لله أنه يوم الجمعة
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، فيروسي (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG2a، κ للفئران
المستضد: إنترلوكين-10 بشري مُعاد التركيب
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)، التقاط ELISA، التحييد (يتم اختباره أثناء التطوير)
التركيز: 0.2 ملغم/مل
RRID: AB_395521
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: 1. التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يمكن استخدام الجسم المضاد JES3-19F1 المقترن بـ PE (رقم المنتج 554706) للتلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليلات التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة لـ IL-10 ضمن مجموعات الخلايا المختلطة (انظر الصورة). وللحصول على أفضل تلوين مناعي فلوري مع تحليل التدفق الخلوي، يجب معايرة هذا الجسم المضاد المضاد للسيتوكين (≤ 0.5 ميكروغرام من الجسم المضاد أحادي النسيلة/مليون خلية). يُعدّ أحد الخيارات التالية ضابطًا مفيدًا لإثبات خصوصية التلوين: 1) حجب الجسم المضاد JES3-19F1 المقترن مسبقًا باستخدام الرابط (مثل، IL-10 البشري المؤتلف؛ رقم المنتج 554611) قبل التلوين، أو 2) حجب الخلايا المثبتة/المنفذة مسبقًا باستخدام الجسم المضاد JES3-19F1 غير الموسوم (رقم المنتج 554705) قبل التلوين. وقد وصف كلٌّ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية التلوين واستخدام ضوابط الحجب بالتفصيل. يُعدّ PE-R35-95 (رقم المنتج 554689) ضابطًا مناسبًا من نوع IgG2a للفئران لتقييم مستوى التلوين الخلفي على الخلايا البشرية المثبتة بالبارافورمالديهايد/المنفذة بالصابونين. يُستخدم بتراكيز مماثلة لتراكيز الجسم المضاد المطلوب (مثلاً، ≤ 0.5 ميكروغرام من الجسم المضاد أحادي النسيلة/مليون خلية). يمكن استخدام خرزات BD™ CompBeads كبدائل لتقييم التداخل الفلوري (التعويض). عند ارتباط الأجسام المضادة المقترنة بالفلوركروم بخرزات CompBeads، فإنها تُظهر خصائص طيفية مشابهة جدًا للخلايا. مع ذلك، قد توجد اختلافات طفيفة في الانبعاثات الطيفية لبعض الفلوركرومات مقارنةً بالخلايا، مما يؤدي إلى قيم تداخل تختلف عند مقارنتها بالضوابط البيولوجية. يُنصح بشدة، عند استخدام كاشف لأول مرة، بمقارنة التداخل على الخلية وخرزات CompBeads للتأكد من ملاءمة خرزات BD CompBeads لتطبيقك الخلوي المحدد. 2. التقاط ELISA: يُعد الجسم المضاد JES3-19F1 النقي (رقم المنتج 554705) مفيدًا كجسم مضاد لالتقاط ELISA الساندويتش لقياس مستويات بروتين IL-10 البشري تحديدًا. يمكن استخدام الجسم المضاد JES3-19F1 النقي مع الجسم المضاد JES3-12G8 المُؤشَّر بالبيوتين (رقم المنتج 554499) كجسم مضاد للكشف، ومع بروتين IL-10 البشري المُعاد تركيبه (رقم المنتج 554611) كمعيار. لاختبار IL-10 في المصل أو البلازما، يُوصى باستخدام مجموعة OptEIA™ الخاصة بنا (رقم المنتج 555134). 3. التحييد: يُعدّ شكل NA/LE™ من المستنسخ JES3-19F1 (رقم المنتج 554704) مفيدًا لتحييد النشاط الحيوي لـ IL-10 البشري. يُعدّ الجسم المضاد R35-95 (رقم المنتج 554687) عنصر تحكم مناسبًا من نوع IgG2a للفئران من نوع NA/LE لمطابقة الجسم المضاد NA/LE JES3-19F1.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يرجى زيارة http://regdocs.bd.com للوصول إلى صحائف بيانات السلامة (SDS). يرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.