BD، 555053، BD Pharmingen™ بيوتين مضاد للفئران، والبشر، والخنازير TGF-β1

التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، الفأر، الخنزير (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG2a، κ للفئران
المستضد: TGF-β1 الفأري المؤتلف
التطبيق: الكشف باستخدام اختبار ELISA (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.5 ملغم/مل
RRID: AB_395674
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالبيوتين في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة البيوتين غير المتفاعل. يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية.
إجراءات التحليل الموصى بها: الكشف بتقنية ELISA: لقياس مستويات بروتين TGF-β1 في الفئران أو البشر أو الخنازير باستخدام تقنية ELISA الساندويتشية، يمكن استخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة A75-3 (رقم المنتج 555053) المُؤشَّر بالبيوتين والموجه ضد TGF-β1 في الفئران أو البشر أو الخنازير ككاشف، وذلك بالتزامن مع الجسم المضاد A75-2 المُنقَّى (رقم المنتج 555052) كجسم مضاد مُثبِّت، وTGF-β1 المُستخلص من الإنسان كمعيار. يجب معايرة الجسم المضاد A75-3 المُؤشَّر بالبيوتين بتركيز يتراوح بين 0.5 و2.0 ميكروغرام/مل لتحديد التركيز الأمثل للكشف بتقنية ELISA. وللحصول على منحنيات معيارية، يُوصى بتخفيف معيار TGF-β1 بتراكيز متضاعفة تتراوح بين 4000 و30 بيكوغرام/مل في كل صفيحة ELISA. للاطلاع على المنهجية المحددة، يُرجى مراجعة الفصل السابع الخاص بتقنية ELISA في دليل تطبيقات تقنيات تحليل وظائف المناعة، الطبعة الأولى، أو زيارة قسم البروتوكولات على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com. ملاحظة: يُوصى باستخدام زوج ELISA هذا بشكل أساسي لقياس السيتوكينات من أنظمة زراعة الخلايا التجريبية. لا يُوصى باستخدام كواشف ELISA هذه لتحليل عينات المصل أو البلازما. لقياس TGF-β1 البشري في المصل أو البلازما، تم تصميم مجموعة BD OptEIA الخاصة بنا لقياس TGF-β1 البشري (رقم المنتج 559119) خصيصًا لهذا الغرض، وهي مُوصى بها. هام: قبل إجراء اختبار ELISA لمستويات بروتين TGF-β1، يجب معالجة عينات السوائل البيولوجية بالتحميض. يُشرح البروتوكول أدناه: بالنسبة لعينات المصل، يُخفف المصل أولاً في محلول فوسفات ملحي (PBS) بنسبة 1:5 (أي 20 ميكرولتر من المصل + 80 ميكرولتر من محلول فوسفات ملحي)، ثم يُضاف حمض الهيدروكلوريك 1N بنسبة 1:25 لضبط الرقم الهيدروجيني إلى 3 (أي 4 ميكرولتر من حمض الهيدروكلوريك 1N لكل 100 ميكرولتر من المصل المخفف). يمكن معالجة السائل الطافي للخلايا غير المخفف بحمض الهيدروكلوريك 1N بنسبة 1:25 لضبط الرقم الهيدروجيني إلى 3 (أي 4 ميكرولتر من حمض الهيدروكلوريك 1N لكل 100 ميكرولتر من السائل الطافي). تُحضن العينات المحمضة لمدة 60 دقيقة عند 4 درجات مئوية (بدلاً من ذلك، يمكن معالجة العينات في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة). بعد التحضين، تُعادل العينات بمعالجة كل عينة بهيدروكسيد الصوديوم 1N بنسبة 1:25، ويُجرى الاختبار فوراً أو تُحفظ عند -70 درجة مئوية لحين الاختبار. ملاحظة: لا يُظهر هذا الزوج من اختبارات ELISA أي تفاعل متقاطع مع السيتوكينات أو الكيموكينات الأخرى (مثل: IL-1α، IL-1β، IL-2، IL-3، IL-4، IL-5، IL-6، IL-7، IL-9، IL-10، IL-11، IL-12، IL-13، IL-15، GM-CSF، IFN-γ، TNF، LT-α، MCP-1، MCP-2، MIP-1α، MIP-1β، SCF، الليمفوتاكتين، VEGF، G-CSF، NT-3، PDGF، CD23، IP-10، GRO، NAP-2، PF4). لطخة ويسترن: يُعد الجسم المضاد A75-3 المُنقّى مفيدًا في لطخة ويسترن. يُرجى العلم أن هذا التطبيق لا يُختبر بشكل روتيني في BD Biosciences Pharmingen.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي.