BD، 555109، BD Pharmingen™ عامل نخر الورم ألفا المُعاد تركيبه للفئران

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة المنتج لأول مرة، يُقسّم عامل نخر الورم الفأري المُعاد تركيبه (رقم المنتج 555109) إلى حصص صغيرة في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين، ويُجمّد عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامه لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم معقم متعادل يحتوي على ما لا يقل عن 0.5 - 10 ملغم/مل من بروتين حامل، مثل ألبومين بشري أو بقري، ثم يُقسّم إلى حصص صغيرة ويُخزّن عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. للاستخدام في التحليلات البيولوجية المخبرية، يُوصى بتركيز بروتين حامل يتراوح بين 0.5 و1 ملغم/مل. أما للاستخدام كمعيار في اختبار ELISA، فيُوصى بتركيز بروتين حامل يتراوح بين 5 و10 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان الفعالية. يجب عدم تخفيف المنتج إلى أقل من 10 ميكروغرام/مل للتخزين طويل الأمد. ينبغي فحص البروتينات الحاملة مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد يكون للبروتينات الحاملة تأثير غير مرغوب فيه على نتائج التجارب بسبب سميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية فيها، أو نشاطها المُثبِّط المحتمل. معيار ELISA: يمكن استخدام بروتين TNF المُعاد تركيبه من الفئران (رقم المنتج 555109) كمعيار كمي لقياس مستويات بروتين TNF في الفئران باستخدام مقايسة ELISA الساندويتشية، وذلك باستخدام الجسم المضاد TN3-19.12 المُنقّى (رقم المنتج 557516) كجسم مضاد لالتقاط البروتين، والجسم المضاد 516D1A1 المُؤشَّر بالبيوتين (رقم المنتج 558415) كجسم مضاد للكشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، قد يرغب الباحثون في استخدام تخفيفات مُضاعفة من بروتين TNF المُعاد تركيبه من الفئران، تتراوح من 10 إلى 0.1 نانوغرام/مل، لتُضاف إلى كل صفيحة ELISA. لقياس عامل نخر الورم (TNF) في مصل أو بلازما الفئران، يُنصح الباحثون بشدة باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Rat TNF ELISA (رقم المنتج 558535) أو مجموعة BD OptEIA™ Rat TNF ELISA (رقم المنتج 560479). فيما يخص التحليل البيولوجي، يُنصح الباحثون بأن تطبيق التحليل البيولوجي لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة، ويُنصح بشدة بمعايرة هذه المادة وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. وقد سُجّل سابقًا نطاق نشاط يتراوح بين 0.25 و5.0 × 10^9 وحدة/ملغ، يشمل قيمة ED50 تتراوح بين 2 و40 بيكوغرام/مل، باستخدام خلايا L929 كخلايا مؤشرة في اختبار تحلل الخلايا MTT/أكتينوميسين د، حيث تُعرّف الوحدة بأنها كمية المادة اللازمة لتحفيز استجابة نصف قصوى عند تشبع السيتوكين.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.