BD، 555494، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد الفأر CD45RO البشري

الاسم البديل: CD45R؛ PTPRC؛ LCA؛ مستضد الكريات البيضاء الشائع؛ GP180؛ LY5؛ T200
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG2a، κ للفأر BALB/c
المستضد: سلالة الخلايا التائية البشرية المعتمدة على إنترلوكين-2
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
رقم الورشة: IV N31
RRID: AB_395885
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy5 (المعروف سابقًا باسم BD Cy-Chrome™) في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط و PE-Cy5 الحر.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر. نظراً لطيف الامتصاص الواسع لصبغة الفلوركروم المزدوجة PE-Cy5، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر التي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. تتكون PE-Cy5 من صبغة فلورية مزدوجة من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بواسطة ضوء 488 نانومتر من ليزر أيون الأرجون ويعمل كمانح للطاقة، مقترنة بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة عند 670 نانومتر. عملت شركة BD Biosciences Pharmingen على زيادة نقل طاقة الفلوركروم في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من PE، وتقليل التباين بين الدفعات. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مزدوج. لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعرض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بها، لضوء الغرفة. وقد أشارت التقارير إلى أن صبغات PE-Cy5 المزدوجة ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أشارت التقارير إلى أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc. ويمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا مع الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المضاد لـ CD16/CD32 للفئران، والمُنقّى باستخدام Mouse BD Fc Block™، من الارتباط غير النوعي للكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 بالخلايا البائية للفئران. مع ذلك، لا يُنصح باستخدام الكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين الخلايا الطحالية لفئران SJL وNOD وMRL، إذ أُبلغ عن تلوين غير نوعي للخلايا اللمفاوية البائية و/أو أنواع أخرى من الكريات البيضاء بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (حيث يُعتقد أن معقد CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يمكن استخدام الكواشف المقترنة بـ PE وPerCP وPerCP-Cy5.5 وAPC وAPC-Cy7 على الكريات البيضاء من هذه السلالات من الفئران. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يُرجى زيارة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources.