BD، 555666، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد CD86 الفأري البشري

الاسم البديل: B7.2؛ B7-2؛ مستضد تنشيط الخلايا الليمفاوية البائية B7-2؛ B70؛ BU63؛ CD28LG2؛ LAB72
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG2b الفأري، κ
المستضد: خط الخلايا اللمفاوية البائية البشرية (JY)
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
رقم ورشة العمل: VI CD86.8
RRID: AB_396020
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy5 (المعروف سابقًا باسم BD Cy-Chrome™) في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy5 الحر.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي ينبعث منه ضوء بطول موجي 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع لصبغة PE-Cy5 المزدوجة، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر التي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. أُفيد أن صبغات PE-Cy5 المزدوجة ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أُفيد أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc أيضًا. يمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا مع الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المضاد لـ CD16/CD32 للفئران، والمُنقى بواسطة Mouse BD Fc Block™، من الارتباط غير النوعي للكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 بالخلايا البائية للفئران. مع ذلك، لا ينبغي استخدام الكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين الخلايا الطحالية لفئران SJL وNOD وMRL، إذ أُفيد أن الخلايا اللمفاوية البائية و/أو كريات الدم البيضاء الأخرى تتلون بشكل غير نوعي بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (حيث يُعتقد أن معقد CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يمكن استخدام الكواشف المقترنة بصبغات الفلوركروم المزدوجة PE، وPerCP، وPerCP-Cy5.5، وAPC، وAPC-Cy7 على خلايا الدم البيضاء من سلالات الفئران هذه. PE-Cy5 عبارة عن صبغة فلورية مزدوجة تتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بواسطة ضوء 488 نانومتر من ليزر أيون الأرجون ويعمل كمانح للطاقة، مقترنة بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتتألق عند 670 نانومتر. وقد حسّنت شركة BD Biosciences Pharmingen نقل طاقة الفلوركروم في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من PE، وتقليل التباين بين الدفعات. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.