BD، 557906، BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 647 Rat IgG2a، κ Isotype Control

النمط المصلي: فأر LOU، المعروف أيضًا باسم Louvain، LOU/C، LOU/M IgG2a، κ
المستضد: الغلوبولين المناعي المجمع للفئران
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي)، التحكم في النمط المتماثل (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر
RRID: AB_396931
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بصبغة أليكسا فلور® 647 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة صبغة أليكسا فلور® 647 غير المتفاعلة. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات الفحص الموصى بها: يجب استخدام عينة تحكم متماثلة النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب (على سبيل المثال، ≤ 1 ميكروغرام/مليون خلية لقياس التدفق الخلوي). ملاحظة هامة: لا يحتوي محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا على عامل نفاذية للخلايا. من الضروري إضافة عامل نفاذية للخلايا عند استخدام محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا لتلوين الخلايا المثبتة والمنفذة باستخدام مجموعة Cytofix/Cytoperm (رقم المنتج 554714). يحتوي محلول BD Perm/Wash™ (رقم المنتج 554723) على عامل النفاذية سابونين، وهو مفيد لهذا الغرض كما هو موضح في قسم الاستخدام أدناه. طريقة الاستخدام للتلوين داخل الخلايا: أعد تعليق 1 × 10⁶ خلية مثبتة ومنفذة في 5 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة المُعايرة مسبقًا و45 ميكرولتر من محلول النفاذية/الغسل 1X (رقم المنتج 554723). حضّن معلق الخلايا لمدة 15 دقيقة (في درجة حرارة الغرفة أو 4 درجات مئوية). اغسل مرتين في 100 ميكرولتر من محلول النفاذية/الغسل 1X (رقم المنتج 554723).
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تُباع مُقترنات الأجسام المضادة المُصبوغة بصبغات Alexa Fluor® و Pacific Blue™ و Cascade Blue® في هذا المنتج بموجب ترخيص من شركة Molecular Probes, Inc. للاستخدام البحثي فقط، باستثناء استخدامها مع المصفوفات الدقيقة، أو ككواشف خاصة بالمادة المُحللة. صبغات Alexa Fluor® (باستثناء Alexa Fluor® 430) وصبغة Pacific Blue™ وصبغة Cascade Blue® محمية ببراءات اختراع قيد الانتظار وصادرة. يتم جمع انبعاث الفلوركروم Alexa Fluor® 647 بنفس إعدادات الجهاز المستخدمة للألوفيوكوسيانين (APC). للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. لذا، يُرجى تخفيف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. Alexa Fluor® علامة تجارية مسجلة لشركة Molecular Probes, Inc.، يوجين، أوريغون.