BD، 558000، BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 700 مضاد TNF للفئران

التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1 للفئران
المستضد: عامل نخر الورم الفأري المؤتلف
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.2 ملغم/مل
RRID: AB_396980
محلول التخزين: محلول منظم مائي يحتوي على مثبت بروتين و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بصبغة أليكسا فلور® 700 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة صبغة أليكسا فلور® 700 غير المتفاعلة. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وقياس التدفق الخلوي: يمكن استخدام الجسم المضاد MP6-XT22 المقترن بـ Alexa Fluor® 700 للتلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليلات قياس التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة لعامل نخر الورم (TNF) ضمن مجموعات الخلايا المختلطة (انظر الشكل). وللحصول على أفضل تلوين مناعي فلوري مع تحليل قياس التدفق الخلوي، يجب معايرة هذا الجسم المضاد المضاد للسيتوكين (≤ 0.5 ميكروغرام من الجسم المضاد أحادي النسيلة/مليون خلية). للاطلاع على المنهجية المحددة، يرجى زيارة موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com، والاطلاع على قسم البروتوكولات أو فصل التلوين داخل الخلايا في دليل وظائف المناعة. يُعدّ أحد الخيارين التاليين ضابطًا مفيدًا لإثبات خصوصية التلوين: 1) حجب الجسم المضاد MP6-XT22 المقترن مسبقًا باستخدام الرابط (مثل TNF الفأري المؤتلف؛ رقم المنتج 554589) قبل التلوين، أو 2) حجب الخلايا المثبتة/المنفذة مسبقًا باستخدام الجسم المضاد MP6-XT22 غير الموسوم (رقم المنتج 554416) قبل التلوين. وقد وصف كلٌّ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية التلوين واستخدام ضوابط الحجب بالتفصيل. يُعدّ Alexa Fluor® 700 Rat IgG1 κ Isotype Control (رقم المنتج 558001) ضابطًا مناسبًا من نوع IgG1 للفئران لتقييم مستوى التلوين الخلفي على خلايا الفئران المثبتة بالبارافورمالدهيد/المنفذة بالصابونين؛ ويُستخدم بتراكيز مماثلة لتراكيز الجسم المضاد المطلوب.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. يتميز Alexa Fluor® 700 بأقصى امتصاص عند حوالي 700 نانومتر وذروة انبعاث فلوري عند حوالي 720 نانومتر. قبل تلوين الخلايا بهذا الكاشف، يُرجى التأكد من قدرة جهاز قياس التدفق الخلوي على إثارة الفلوركروم وتمييز الفلورة الناتجة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى مراجعة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تُباع مُقترنات الأجسام المضادة المُصبوغة بصبغات Alexa Fluor® و Pacific Blue™ و Cascade Blue® في هذا المنتج بموجب ترخيص من شركة Molecular Probes, Inc. للاستخدام البحثي فقط، باستثناء استخدامها مع المصفوفات الدقيقة أو ككواشف مُخصصة لمادة مُعينة. وتخضع صبغات Alexa Fluor® (باستثناء Alexa Fluor® 430) و Pacific Blue™ و Cascade Blue® لبراءات اختراع قيد الانتظار وصادرة. ويمكن أن يندرج استخدام هذه المنتجات لقياس مُستضدات التنشيط المُعبر عنها على مجموعات فرعية من الخلايا أحادية النواة لغرض مراقبة حالة تنظيم المناعة تحت واحد أو أكثر من براءات الاختراع التالية: براءات الاختراع الأمريكية رقم 5,445,939 و 5,656,446 و 5,843,689؛ براءة الاختراع الأوروبية رقم 319,543؛ براءة الاختراع الكندية رقم 1,296,622؛ براءة الاختراع الأسترالية رقم 615,880. وبراءة الاختراع اليابانية رقم 2,769,156. Alexa Fluor® هي علامة تجارية مسجلة لشركة Molecular Probes, Inc.، يوجين، أوريغون.