BD، 558064، مزيج الأجسام المضادة لتنشيط الخلايا اللمفاوية البائية للفئران من BD Pharmingen™، مع عنصر تحكم متماثل النمط؛ PE-Cy™7 CD25، وPE CD69، وFITC CD19

التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
RRID: AB_397011
الوصف: مزيج الأجسام المضادة لتنشيط الخلايا اللمفاوية البائية في الفئران هو كاشف ثلاثي الألوان مصمم لتحديد المجموعات الفرعية الرئيسية من الخلايا اللمفاوية البائية عن طريق التلوين المناعي الفلوري المباشر مع تحليل التدفق الخلوي. يتفاعل الجسم المضاد PC61 مع CD25، وهو سلسلة ألفا لمستقبل IL-2 منخفضة الألفة (IL-2Rα، p55) الموجودة على الخلايا اللمفاوية التائية والبائية المنشطة من جميع سلالات الفئران المختبرة. يوجد CD25 أيضًا على بعض الخلايا البائية النامية في نخاع العظم، والخلايا التائية النامية مبكرًا في الغدة الزعترية، والخلايا التائية التنظيمية CD4+ المحيطية (Treg)، والخلايا المتغصنة. يتفاعل الجسم المضاد H1.2F3 مع CD69 (مستضد التنشيط المبكر جدًا). ​​يتم تحفيز التعبير عنه بسرعة عند تنشيط الخلايا اللمفاوية (الخلايا التائية، والبائية، والخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا القاتلة الطبيعية التائية)، والعدلات، والبلعميات. كما يتم التعبير عن CD69 على الخلايا الزعترية التي تخضع للاختيار الإيجابي. يتفاعل الجسم المضاد 1D3 مع CD19، وهو مستضد تمايز سلالة الخلايا اللمفاوية البائية، والذي يُعبر عنه خلال مراحل تطور الخلايا اللمفاوية البائية، بدءًا من الخلية البائية الأولية وصولًا إلى مراحل الخلية البائية الناضجة. لا تُعبر خلايا البلازما المتمايزة نهائيًا عن CD19. تم معايرة الأجسام المضادة الثلاثة وتخفيفها مسبقًا، ثم خلطها معًا، وتركيبها لتحقيق أفضل أداء في التلوين. يحتوي عنصر التحكم النظيري لتنشيط الخلايا اللمفاوية البائية في الفئران على تراكيز مكافئة من الغلوبولين المناعي للتحكم السلبي المتطابق مع الفلوركروم والنظير. يسمح استخدام ثلاثة فلوركرومات مختلفة لوسم الأجسام المضادة الثلاثة المختلفة بالتعرف على كل مستضد من المستضدات الثلاثة على كل خلية في العينة. تميز مستويات التعبير عن المستضدات الثلاثة المجموعات الفرعية الرئيسية للخلايا اللمفاوية البائية النامية والمحيطية. يمكن دمج كواشف إضافية موسومة بالفلوركروم مع مزيج الأجسام المضادة لتنشيط الخلايا اللمفاوية البائية في الفئران، وعنصر التحكم النظيري لتنشيط الخلايا اللمفاوية البائية في الفئران، لمزيد من توصيف المجموعات الفرعية للخلايا البائية.
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy7 الحر. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر. تم ربط الجسم المضاد بـ FITC في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من FITC غير المتفاعل. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى الرجوع إلى صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يُعد PE-Cy7 فلوروكرومًا مزدوجًا يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بضوء طوله الموجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy7، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر أقصى تألق عند 780 نانومتر. يتم جمع انبعاث الفلوركروم المزدوج PE-Cy7 في كاشف لأطوال موجية للفلورة تبلغ 750 نانومتر فأكثر. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من PE. لذلك، نوصي بإجراء فحوصات تعويض فردية لكل مُقترن PE-Cy7. تم تحسين PE-Cy7 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر، ولا يوجد تداخل كبير بين أطياف انبعاث PE-Cy7 وFITC. عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، والتي قد تُثير كلاً من PE وCy7 مباشرةً، نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليل البيانات. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: يمكن أن يُغير امتصاص الضوء المرئي بشكل كبير نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. Cy هي علامة تجارية مسجلة لشركة Amersham Biosciences Limited. يُباع هذا المنتج المقترن بموجب ترخيص لبراءات الاختراع التالية: براءات الاختراع الأمريكية أرقام 5,486,616؛ 5,569,587؛ 5,569,766؛ 5,627,027. تحذير: تُظهر بعض مقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها مع التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا لم تتمكن من تحليل العينات المثبتة خلال أربع ساعات، نوصي باستخدام مثبت BD™ Stabilizing Fixative (رقم المنتج 338036). مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. لذا، يُرجى تخفيف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. هذا المنتج محمي بحقوق الملكية الفكرية لشركة Amersham Biosciences Corp. وجامعة كارنيجي ميلون، ويتم تصنيعه وبيعه بموجب ترخيص من شركة Amersham Biosciences Corp. هذا المنتج مرخص للبيع لأغراض البحث العلمي فقط، ولا يُرخص لأي استخدام آخر. إذا كنت بحاجة إلى ترخيص تجاري لاستخدام هذا المنتج ولم يكن لديك ترخيص، فيُرجى إرجاع هذه المادة غير مفتوحة إلى BD Biosciences، 10975 Torreyana Rd، سان دييغو، كاليفورنيا 92121، وسيتم رد أي مبلغ مدفوع مقابلها.
الوصف: الكمية/الحجم: رقم القطعة: معرف EntrezGene
غير متوفر : 100.0 : غير متوفر : غير متوفر