BD، 558257، BD Pharmingen™ APC Mouse Anti-Human CD3ε

التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، فأر (تم الإبلاغ عنه)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_647163
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد ببروتين APC في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وبروتين APC الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: بروتوكول إجراءات الفحص الموصى بها لتثبيت خلايا الدم المحيطية أحادية النواة (PBMC) ونفاذيتها وتلوينها: 1. اجمع خلايا الدم المحيطية أحادية النواة (PBMC) وعدّها وترسيبها باتباع الإجراءات القياسية. 2. أثناء الخلط، أضف 5 مل من الإيثانول البارد بتركيز 70-80% قطرةً قطرةً إلى راسب الخلايا (1-5 × 10^7 خلية). حضّن عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة ساعتين على الأقل. يمكن تخزين هذه الخلايا المثبتة عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة تصل إلى 60 يومًا قبل التلوين. 3. اغسل مرتين بـ 30-40 مل من محلول التلوين (PBS مع 1% FBS، 0.09% NaN3)، ثم قم بالطرد المركزي لمدة 10 دقائق عند 200 × g. 4. أعد تعليق الخلايا بتركيز 1 × 10^7 خلية/مل. 5. انقل 100 ميكرولتر (1 × 10^6 خلية) من معلق الخلايا إلى كل أنبوب عينة. ٦. أضف ٢٠ ميكرولتر من الأجسام المضادة المُرتبطة بالفلورة والمُخففة بشكل صحيح إلى الأنابيب المذكورة أعلاه. اخلط برفق. ٧. حضّن الأنابيب في درجة حرارة الغرفة لمدة ٢٠-٣٠ دقيقة في الظلام. ٨. اغسل بـ ٢ مل من محلول التلوين عند ٢٠٠ × جم لمدة ٥ دقائق. ٩. تخلص من السائل الطافي. ١٠. أضف ٠.٥ مل من محلول التلوين إلى كل أنبوب. ١١. تابع تحليل التدفق الخلوي.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يمكن استخدام هذا الكاشف المقترن بـ APC في أي جهاز قياس تدفق خلوي مزود بليزر صبغة أو ليزر هيليوم-نيون أو ليزر ثنائي أحمر. يرجى زيارة http://regdocs.bd.com للاطلاع على صحائف بيانات السلامة (SDS). يرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.