BD، 559328، BD Pharmingen™ PE Rat Anti-Human IL-13

الاسم البديل: إنترلوكين-13؛ NC30؛ ALRH؛ BHR1؛ P600
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1 للفئران
المستضد: إنترلوكين-13 البشري المؤتلف
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_397225
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يمكن استخدام الجسم المضاد JES10-5A2 المقترن بـ PE للتلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة لـ IL-13 ضمن مجموعات الخلايا المختلطة (انظر الشكل). تم معايرة تركيبة 100 اختبار من الجسم المضاد JES10-5A2 المقترن بـ PE مسبقًا لضمان الكشف الفعال داخل الخلايا عن IL-13 البشري باستخدام 20 ميكرولتر/1 × 10^6 خلية. للاطلاع على المنهجية المحددة، يرجى زيارة موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com، والاطلاع على قسم البروتوكولات أو فصل التلوين داخل الخلايا في دليل وظائف المناعة. يُعدّ أحد الخيارات التالية ضابطًا مفيدًا لإثبات خصوصية التلوين: 1) حجب الجسم المضاد PE-JES10-5A2 مسبقًا باستخدام الرابط (مثل IL-13 البشري) قبل التلوين، أو 2) حجب الخلايا المثبتة بالفورمالديهايد والمنفذة بالصابونين مسبقًا باستخدام الجسم المضاد JES10-5A2 غير الموسوم (مثل رقم المنتج 554570) قبل التلوين. وقد وصف كلٌّ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية التلوين داخل الخلايا واستخدام الضوابط الحاجبة بالتفصيل. كما يتوفر أيضًا جسم مضاد PE-R3-34 (رقم المنتج 559318) كضابط تحكم مناسب من نوع IgG1 للفئران لتقييم مستوى التلوين الخلفي على خلايا الفئران أو البشر المثبتة بالفورمالديهايد والمنفذة بالصابونين، وذلك في تركيبة بحجم 100 اختبار. ملاحظة هامة: لا يحتوي محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا على عامل نفاذية للخلايا. من الضروري إضافة عامل نفاذية للخلايا عند استخدام محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا لتلوين الخلايا المُثبتة والمُنفذة. يحتوي محلول Perm/Wash™ (رقم المنتج 554723) على عامل النفاذية سابونين، وهو مفيد لهذا الغرض كما هو موضح في قسم الاستخدام أدناه. طريقة الاستخدام: 1. أعد تعليق 1 × 10⁶ خلية مُثبتة ومُنفذة في 20 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا و30 ميكرولتر من محلول Perm/Wash™ المُخفف (رقم المنتج 554723). 2. حضّن معلق الخلايا لمدة 15 دقيقة (في درجة حرارة الغرفة أو 4 درجات مئوية). 3. اغسل مرتين باستخدام 100 ميكرولتر من محلول Perm/Wash™ المُخفف (رقم المنتج 554723).
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى مراجعة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب.