BD، 559329، BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human IL-12 (p40/p70)

التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1 الفأري
المستضد: ثنائي غير متجانس من بروتين IL-12 البشري المؤتلف p70 المُعبَّر عنه في خلايا CHO
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_397226
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يُعدّ الجسم المضاد C11.5 مفيدًا في التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة للإنترلوكين-12 ضمن مجموعات الخلايا المختلطة. تمت معايرة تركيبة 100 اختبار من الجسم المضاد C11.5 المقترن بـ PE مسبقًا لضمان الكشف الفعال داخل الخلايا عن الإنترلوكين-12 البشري باستخدام 20 ميكرولتر/1 × 10⁶ خلية. يُعدّ أحد الخيارين التاليين ضابطًا مفيدًا لإثبات خصوصية التلوين: 1) حجب الجسم المضاد C11.5 المُقترن بالفلوركروم مسبقًا باستخدام كمية زائدة من الليجاند (مثل: IL-12 p70 البشري المؤتلف، (رقم المنتج 554613) أو IL-12 p40 البشري المؤتلف، (رقم المنتج 554633)) قبل التلوين، أو 2) حجب الخلايا المُثبّتة/المُنفذة مسبقًا باستخدام الجسم المضاد C11.5 غير المُوسوم (رقم المنتج 554573) قبل التلوين. وقد وُصفت تقنية التلوين داخل الخلايا واستخدام ضوابط الحجب بالتفصيل من قِبل سي. بروسين ودي. ميتكالف. يتوفر أيضًا عنصر تحكم مناسب من نوع IgG1 للفأر لتقييم مستوى التلوين الخلفي على الخلايا البشرية المثبتة بالبارافورمالديهايد والمنفذة بالصابونين، وذلك في تركيبة بحجم 100 اختبار PE-MOPC-21 (رقم المنتج 559320). ملاحظة هامة: لا يحتوي محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا على عامل نفاذية للخلايا. من الضروري إضافة عامل نفاذية للخلايا عند استخدام محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا لتلوين الخلايا المثبتة والمنفذة. يحتوي محلول BD Perm/Wash™ Buffer (رقم المنتج 554723) على عامل النفاذية الصابونين، وهو مفيد لهذا الغرض كما هو موضح في قسم الاستخدام. طريقة الاستخدام: 1. أعد تعليق 1 × 10⁶ خلية مثبتة ومنفذة في 20 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة المُعايرة مسبقًا و30 ميكرولتر من محلول BD Perm/Wash Buffer بتركيز 1X (رقم المنتج 554723). 2. حضّن معلق الخلايا لمدة 15 دقيقة (في درجة حرارة الغرفة أو 4 درجات مئوية). 3. اغسل مرتين باستخدام 100 ميكرولتر من محلول BD Perm/Wash Buffer بتركيز 1X (رقم المنتج 554723).
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى مراجعة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. فيكول-باك هي علامة تجارية مسجلة لشركة أميرشام للعلوم الحيوية المحدودة.