BD، 559332، BD Pharmingen™ PE Rat Anti-Human IL-5

التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG2a للفئران
المستضد: إنترلوكين-5 بشري مُعاد التركيب
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_397229
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يُعدّ الجسم المضاد JES1-39D10 مفيدًا في التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا البشرية المنتجة للإنترلوكين-5 ضمن مجموعات الخلايا المختلطة. ويُعدّ الجسم المضاد JES1-39D10 المقترن بـ PE مناسبًا بشكل خاص لهذه التجارب (انظر الشكل). تمّت معايرة تركيبة 100 Test Size من الجسم المضاد JES1-39D10 المقترن بـ PE مسبقًا لضمان الكشف الفعال داخل الخلايا عن الإنترلوكين-5 البشري باستخدام 20 ميكرولتر/1 × 10⁶ خلية. للاطلاع على المنهجية المحددة، يُرجى زيارة موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com، والاطلاع على قسم البروتوكولات أو فصل التلوين داخل الخلايا في دليل وظائف المناعة. يُعدّ أحد الخيارين التاليين ضوابط مفيدة لإثبات خصوصية التلوين: 1) حجب الجسم المضاد PE-JES1-39D10 مسبقًا باستخدام كمية زائدة من الليجاند (مثل إنترلوكين-5 البشري، رقم المنتج 554606) قبل التلوين، أو 2) حجب الخلايا المثبتة بالفورمالديهايد والمنفذة بالصابونين مسبقًا باستخدام الجسم المضاد JES1-39D10 غير الموسوم (مثل رقم المنتج 554488) قبل التلوين. وقد وصف كلٌّ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية التلوين داخل الخلايا واستخدام ضوابط الحجب بالتفصيل. كما يتوفر أيضًا ضابط مناسب من نوع IgG2a للفئران لتقييم مستوى التلوين الخلفي على خلايا الفئران أو البشر المثبتة بالفورمالديهايد والمنفذة بالصابونين، وذلك في تركيبة بحجم 100 اختبار PE-R35-95 (رقم المنتج 559317). ملاحظة هامة: لا يحتوي محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا على عامل نفاذية للخلايا. من الضروري إضافة عامل نفاذية للخلايا عند استخدام محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا لتلوين الخلايا المُثبتة والمُنفذة. يحتوي محلول Perm/Wash™ (رقم المنتج 554723) على عامل النفاذية سابونين، وهو مفيد لهذا الغرض كما هو موضح في قسم الاستخدام. طريقة الاستخدام: 1. أعد تعليق 1 × 10⁶ خلية مُثبتة ومُنفذة في 20 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا و30 ميكرولتر من محلول Perm/Wash™ المُخفف (رقم المنتج 554723). 2. حضّن معلق الخلايا لمدة 15 دقيقة (في درجة حرارة الغرفة أو 4 درجات مئوية). 3. اغسل مرتين باستخدام 100 ميكرولتر من محلول Perm/Wash™ المُخفف (رقم المنتج 554723).
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). نظرًا لاختلاف التطبيقات، يجب على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى الرجوع إلى صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة.