BD، 559337، BD Pharmingen™ PE Rat Anti-Human and Viral IL-10

التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، فيروسي (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 للفئران
المستضد: إنترلوكين-10 بشري مُعاد التركيب
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_397232
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يمكن استخدام الجسم المضاد JES3-9D7 المقترن بـ PE للتلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة لـ IL-10 ضمن مجموعات الخلايا المختلطة (انظر الصورة). تم معايرة تركيبة 100 اختبار من الجسم المضاد JES3-9D7 المقترن بـ PE مسبقًا لضمان الكشف الفعال داخل الخلايا عن IL-10 البشري والفيروسي باستخدام 20 ميكرولتر/1 × 10^6 خلية. يُعدّ أحد الخيارين التاليين ضابطًا مفيدًا لإثبات خصوصية التلوين: 1) حجب الجسم المضاد JES3-9D7 المقترن مسبقًا بالرابط (IL-10 البشري المؤتلف؛ رقم المنتج 554611) قبل التلوين، أو 2) حجب الخلايا المثبتة/المنفذة مسبقًا بالجسم المضاد JES3-9D7 غير الموسوم (رقم المنتج 554496) قبل التلوين. وقد وصف كلٌّ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية التلوين واستخدام ضوابط الحجب بالتفصيل. كما يتوفر ضابط مناسب من نوع IgG1 للفئران لتقييم مستوى التلوين الخلفي على الخلايا البشرية المثبتة بالبارافورمالديهايد/المنفذة بالصابونين، وذلك في تركيبة بحجم 100 اختبار PE-R3-34 (رقم المنتج 559318). للاطلاع على المنهجية المحددة، يُرجى زيارة قسم البروتوكولات أو فصل التلوين داخل الخلايا في دليل وظائف المناعة، وكلاهما منشور على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com. ملاحظة هامة: لا يحتوي محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا على عامل نفاذية للخلايا. من الضروري إضافة عامل نفاذية للخلايا عند استخدام محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا لتلوين الخلايا المثبتة والمنفذة. يحتوي محلول Perm/Wash™ (رقم المنتج 554723) على عامل النفاذية سابونين، وهو مفيد لهذا الغرض كما هو موضح في قسم الاستخدام أدناه. طريقة الاستخدام: 1. أعد تعليق 1 × 10^6 خلية مثبتة ومنفذة في 20 ميكرولتر من محلول الأجسام المضادة المُعاير مسبقًا و30 ميكرولتر من محلول Perm/Wash™ بتركيز 1X (رقم المنتج 554723). ٢. حضّن معلق الخلايا لمدة ١٥ دقيقة (في درجة حرارة الغرفة أو ٤ درجات مئوية). ٣. اغسل مرتين باستخدام ١٠٠ ميكرولتر من محلول Perm/Wash™ المخفف (رقم المنتج ٥٥٤٧٢٣).
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). نظرًا لاختلاف التطبيقات، يجب على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يُرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي.