BD، 559560، BD Pharmingen™ مضاد الفأر النقي المضاد لـ CD196 البشري (CCR6)

الاسم البديل: BN-1؛ CC CKR-6؛ مستقبل الكيموكين CC من النوع 6؛ CC-CKR-6؛ CCR-6
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
المستضد: ببتيد CD196/CCR6 البشري
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.5 ملغم/مل
رقم الورشة: IX 48
RRID: AB_2291135
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي بواسطة كروماتوغرافيا التقارب.
إجراءات الفحص الموصى بها: يمكن استخدام الجسم المضاد 11A9 النقي (رقم المنتج 559560) للتلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي لخلايا الدم البيضاء البشرية (انظر الصورة) وخطوط الخلايا التي تُعبر عن CCR6. يُوصى باتباع إجراء تلوين متعدد الخطوات لتضخيم الإشارات المناعية الفلورية لتحليل التدفق الخلوي لتعبير CCR6 البشري: الخطوة 1: حضن الخلايا مع 0.1 - 1 ميكروغرام من الجسم المضاد 11A9 النقي عند 4 درجات مئوية لمدة 15-20 دقيقة. غسل الخلايا مرتين بوسط التلوين الذي يحتوي على أزيد الصوديوم (مثل محلول دولبيكو الفوسفاتي الملحي أو وسط زراعة الأنسجة [بدون فينول أحمر وبيوتين] مع 0.09% أزيد الصوديوم و2% مصل جنيني بقري مُعطل حرارياً أو 0.2% ألبومين مصل البقر). الخطوة 2: حضّن الخلايا مع 0.25 ميكروغرام من الغلوبولين المناعي المضاد للفأر المُؤشَّر بالبيوتين (رقم المنتج 553999) عند درجة حرارة 4 مئوية لمدة 20 دقيقة. اغسل الخلايا مرتين. الخطوة 3: حضّن الخلايا مع ≤ 0.06 ملغ من ستربتأفيدين-فيكوإريثرين (رقم المنتج 554061) عند درجة حرارة 4 مئوية لمدة 20 دقيقة. اغسل الخلايا مرتين. أعد تعليق الخلايا في وسط التلوين، ثم حلل الخلايا الملونة باستخدام جهاز قياس التدفق الخلوي BD FACScan™ (شركة BD Biosciences، سان خوسيه، كاليفورنيا) مع مراعاة ضوابط الخصوصية والتعويض المناسبة.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. أزيد الصوديوم مثبط عكسي لعملية الأيض التأكسدي؛ لذلك، يجب عدم استخدام مستحضرات الأجسام المضادة التي تحتوي على هذه المادة الحافظة في مزارع الخلايا أو حقنها في الحيوانات. يمكن إزالة أزيد الصوديوم عن طريق غسل الخلايا المصبوغة أو الجسم المضاد المرتبط بالصفيحة أو عن طريق غسيل الجسم المضاد القابل للذوبان في محلول منظم خالٍ من أزيد الصوديوم. نظرًا لأن السموم الداخلية قد تؤثر أيضًا على نتائج الدراسات الوظيفية، فإننا نوصي باستخدام صيغة الجسم المضاد NA/LE (خالية من الأزيد/منخفضة السموم الداخلية)، إن وجدت، للاستخدام في المختبر وفي الجسم الحي. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.