BD، 560071، BD Pharmingen™ مستضد TRA-1-60 نقي من الفئران مضاد للإنسان

الاسم البديل: TRA-1-60(R)
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، ريسوس (تم الإبلاغ عنه)
النمط المصلي: IgM الفأري BALB/c، κ
المستضد: خط خلايا سرطان الجنين البشري
التطبيقات: لطخة ويسترن (يتم اختبارها بشكل روتيني)، التصوير الحيوي (يتم اختباره أثناء التطوير)، قياس التدفق الخلوي، الترسيب المناعي، المقايسة المناعية الإشعاعية (تم الإبلاغ عنها)
الوزن الجزيئي المستهدف: متعدد، >200 كيلو دالتون
التركيز: 0.5 ملغم/مل
RRID: AB_1645604
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي بواسطة كروماتوغرافيا التقارب.
إجراءات الفحص الموصى بها: التصوير الحيوي: 1. تُزرع الخلايا في وسط زراعة مناسب بكثافة خلوية مناسبة في صفيحة تصوير BD Falcon™ ذات 96 بئرًا (رقم المنتج 353219)، وتُزرع لمدة تتراوح بين ليلة واحدة و48 ساعة. 2. يُزال وسط الزراعة من الآبار، وتُغسل الآبار مرتين بـ 100 ميكرولتر من محلول الفوسفات الملحي (PBS) بتركيز 1×، وتُثبّت الخلايا بإضافة 100 ميكرولتر من الفورمالديهايد الطازج بتركيز 3.7% في محلول الفوسفات الملحي (PBS) أو محلول التثبيت BD Cytofix™ (رقم المنتج 554655) إلى كل بئر، وتُحضن لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. 3. يُزال المُثبِّت من الآبار، وتُغسل الآبار مرتين بـ 100 ميكرولتر من محلول الفوسفات الملحي (PBS) بتركيز 1×. ٤. خفف الجسم المضاد في محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز ١×، ثم صبغ الخلايا بإضافة ٥٠ ميكرولتر من الجسم المضاد المخفف إلى كل بئر وحضانتها لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. ٥. أزل الجسم المضاد المخفف، واغسل الآبار ثلاث مرات باستخدام ١٠٠ ميكرولتر من محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز ١×. ٦. أزل محلول الفوسفات الملحي (PBS)، ثم خفف كاشف الخطوة الثانية في محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز ١×، ثم صبغ الخلايا بإضافة ٥٠ ميكرولتر من كاشف الخطوة الثانية المخفف إلى كل بئر وحضانتها لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. ٧. أزل كاشف الخطوة الثانية المخفف، واغسل الآبار مرتين باستخدام ١٠٠ ميكرولتر من محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز ١×. ٨. أزل محلول الفوسفات الملحي (PBS)، ثم قم بتلوين النوى بإضافة ١٠٠ ميكرولتر من محلول هوكست ٣٣٣٤٢ بتركيز ٢ ميكروغرام/مل (مثلًا، سيغما-ألدريتش، رقم المنتج B2261) في محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز ١× إلى كل بئر قبل ١٥ دقيقة على الأقل من التصوير. ٩. اعرض الخلايا وحللها باستخدام جهاز تصوير مناسب. التصوير الحيوي: لمزيد من المعلومات التفصيلية، يُرجى الرجوع إلى الرابط التالي: http://www.bdbiosciences.com/support/resources/protocols/ceritifed_reagents.jsp. التحليل المناعي الغربي: لمزيد من المعلومات التفصيلية، يُرجى الرجوع إلى الرابط التالي: http://www.bdbiosciences.com/pharmingen/protocols/Western_Blotting.shtml
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تم تطوير هذا الجسم المضاد واعتماده لتطبيقات التصوير الحيوي. مع ذلك، لا يُجرى اختبار التصوير الحيوي الروتيني على كل دفعة. يُنصح الباحثون بمعايرة الكاشف للحصول على أفضل أداء.