BD، 560173، BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 488 مستضد الفأر المضاد لـ TRA-1-60 البشري

الاسم البديل: TRA-1-60(R)
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، ريسوس (تم الإبلاغ عنه)
النمط المصلي: IgM الفأري BALB/c، κ
المستضد: خط خلايا سرطان الجنين البشري
التطبيق: التصوير الحيوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر
RRID: AB_1645379
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA ومثبت البروتين و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بصبغة أليكسا فلور® 488 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة صبغة أليكسا فلور® 488 غير المتفاعلة.
إجراءات الفحص الموصى بها: 1. ازرع الخلايا في وسط زراعة مناسب بكثافة خلوية ملائمة في صفيحة تصوير BD Falcon™ ذات 96 بئرًا (رقم المنتج 353219)، واتركها في الحضانة من ليلة إلى 48 ساعة. 2. أزل وسط الزراعة من الآبار، واغسلها مرتين بـ 100 ميكرولتر من محلول الفوسفات الملحي (PBS) بتركيز 1×، ثم ثبّت الخلايا بإضافة 100 ميكرولتر من الفورمالديهايد الطازج بتركيز 3.7% في محلول الفوسفات الملحي (PBS) أو محلول التثبيت BD Cytofix™ (رقم المنتج 554655) إلى كل بئر، واحضنها لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. 3. أزل المُثبِّت من الآبار، واغسلها مرتين بـ 100 ميكرولتر من محلول الفوسفات الملحي (PBS) بتركيز 1×. ٤. خفف الجسم المضاد بنسبة ١:١٠ في محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز ١×، ثم صبغ الخلايا بإضافة ٥٠ ميكرولتر من محلول الجسم المضاد المخفف إلى كل بئر، وحضانتها لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. ٥. أزل الجسم المضاد المخفف، واغسل الآبار مرتين بـ ١٠٠ ميكرولتر من محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز ١×. ٦. أزل محلول الفوسفات الملحي (PBS)، ثم صبغ النوى بإضافة ١٠٠ ميكرولتر من محلول هوكست ٣٣٣٤٢ بتركيز ٢ ميكروغرام/مل (مثلًا، سيغما-ألدريتش، رقم المنتج B2261) في محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز ١× إلى كل بئر قبل التصوير بـ ١٥ دقيقة على الأقل. ٧. اعرض الخلايا وحللها باستخدام جهاز تصوير مناسب. المرشحات الموصى بها لأجهزة تحليل الخلايا BD Pathway™ هي: مرشح الإثارة، مرشح الانبعاث، مرشح ثنائي اللون BD Pathway 855 488/10 515 LP Fura/FITC، مرشح BD Pathway 435 482/35 536/40 FF506
إشعارات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار عند اتباع إجراء الفحص الموصى به. يتكون الاختبار عادةً من حوالي 10000 خلية مزروعة في بئر من صفيحة تصوير ذات 96 بئرًا. Alexa Fluor® هي علامة تجارية مسجلة لشركة Molecular Probes, Inc.، يوجين، أوريغون. تُباع مُقترنات الأجسام المضادة المصبوغة بصبغات Alexa Fluor® و Pacific Blue™ و Cascade Blue® في هذا المنتج بموجب ترخيص من شركة Molecular Probes, Inc. للاستخدام البحثي فقط، باستثناء استخدامها مع المصفوفات الدقيقة، أو ككواشف خاصة بالمادة المُحللة. صبغات Alexa Fluor® (باستثناء Alexa Fluor® 430) وصبغة Pacific Blue™ وصبغة Cascade Blue® محمية ببراءات اختراع قيد الانتظار وصادرة. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. قم بتخفيف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. يرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.