BD، 560249، كوكتيل الخلايا التائية التنظيمية البشرية BD Pharmingen™

التطبيق: قياس التدفق الخلوي (تم اختباره أثناء التطوير)
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
RRID: AB_1645496
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوصف: مزيج الخلايا التائية التنظيمية البشرية هو كاشف ثلاثي الألوان يُستخدم لتحديد مجموعة الخلايا التائية التنظيمية الطبيعية (nTreg). يرتبط نمط التعبير عن CD4+CD25 int /brightCD127 dim ارتباطًا وثيقًا بتعبير عامل النسخ FoxP3. يُعتبر FoxP3 علامةً نوعيةً للخلايا التائية التنظيمية (Tregs). يتعرف الجسم المضاد SK3 على CD4، وهو مستضد يُعبر عنه بشكل أساسي على الخلايا اللمفاوية التائية المساعدة/المحفزة، على الرغم من وجود هذا المستضد أيضًا بكثافة منخفضة على الخلايا الوحيدة. يتعرف الجسم المضاد 2A3 على CD25، وهو مستضد يُعرف أيضًا باسم مستقبل الإنترلوكين-2 البشري منخفض الألفة (IL-2R). يوجد مستضد CD25 على مجموعة فرعية من الخلايا اللمفاوية في الدم المحيطي. تزداد كثافة المستضد على الخلايا اللمفاوية التائية المنشطة بواسطة الفيتوهيماغلوتينين (PHA) والكونكانافالين أ (Con A) وCD3. الخلايا اللمفاوية التائية من مزارع الخلايا اللمفاوية المختلطة؛ وسلالات خلايا سرطان الدم اللمفاوي التائي المصابة بفيروس HTLV. يتفاعل HIL-7R-M21 مع البروتين السكري CD127 الذي يتراوح وزنه الجزيئي بين 60 و90 كيلو دالتون. يُعرف CD127 أيضًا باسم مستقبل IL-7 ألفا (IL-7Rα). يتكون هذا المستقبل من جزأين غير متجانسين: CD127 وسلسلة غاما المشتركة، والتي تشترك فيها مستقبلات السيتوكينات الأخرى (IL-2R، IL-4R، IL-9R، وIL-15R). يُعبر عن CD127 على الخلايا التيموسية، والخلايا السلفية للخلايا التائية والبائية، والخلايا التائية الناضجة، وبعض الخلايا اللمفاوية والنخاعية.
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالصبغة في ظل الظروف المثلى، ثم أُزيل الجسم المضاد غير المرتبط والصبغة الحرة.
إجراءات التحليل الموصى بها: يمكن استخدام خرز BD® CompBeads كبديل لتقييم التداخل الفلوري (التعويض). عند ارتباط الأجسام المضادة المقترنة بالفلوركروم بخرز BD® CompBeads، فإنها تمتلك خصائص طيفية مشابهة جدًا للخلايا. مع ذلك، قد توجد اختلافات طفيفة في الانبعاثات الطيفية لبعض الفلوركرومات مقارنةً بالخلايا، مما يؤدي إلى قيم تداخل تختلف عند مقارنتها بالضوابط البيولوجية. يُنصح بشدة، عند استخدام أي كاشف لأول مرة، بمقارنة التداخل على الخلايا وخرز BD® CompBeads للتأكد من ملاءمة خرز BD® CompBeads لتطبيقك الخلوي المحدد.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تحذير: تُظهر بعض مقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها مع التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا لم تتمكن من تحليل العينات المثبتة في غضون أربع ساعات، نوصي باستخدام مثبت BD™ (رقم المنتج 338036). للحصول على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يُعدّ PE-Cy7 فلوروكرومًا مزدوجًا يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بضوء طوله الموجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مُقترنًا بصبغة السيانين Cy7، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة قصوى عند 780 نانومتر. يتم جمع انبعاث فلوروكروم PE-Cy7 المزدوج في كاشف لأطوال موجية للفلورة تبلغ 750 نانومتر فأكثر. على الرغم من بذل قصارى جهدنا لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من PE. لذلك، نوصي بإجراء فحوصات تعويض فردية لكل مُقترن PE-Cy7. تم تحسين PE-Cy7 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر، ولا يوجد تداخل يُذكر بين أطياف انبعاث PE-Cy7 وFITC. عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، التي قد تُثير كلاً من PE وCy7 بشكل مباشر، نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليلها. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. تُباع مُقترنات الأجسام المضادة المُصبغة Alexa Fluor® وPacific Blue™ وCascade Blue® في هذا المنتج بموجب ترخيص من شركة Molecular Probes, Inc. للاستخدام البحثي فقط، باستثناء استخدامها مع المصفوفات الدقيقة أو ككواشف خاصة بالمادة المُحللة. تخضع أصباغ Alexa Fluor® (باستثناء Alexa Fluor® 430) وصبغة Pacific Blue™ وصبغة Cascade Blue® لبراءات اختراع قيد الانتظار وصادرة. يتم جمع انبعاث فلوروكروم Alexa Fluor® 647 بنفس إعدادات الجهاز المُستخدمة مع الألوفيوكوسيانين (APC). يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. يرجى مراجعة http://regdocs.bd.com للوصول إلى صحائف بيانات السلامة (SDS). Cy هي علامة تجارية لشركة Global Life Sciences Solutions Germany GmbH أو إحدى الشركات التابعة لها التي تعمل تحت اسم Cytiva. يُقدَّم هذا المنتج بموجب ترخيص ملكية فكرية بين شركة Life Technologies Corporation وشركة BD Businesses. يمنح شراء هذا المنتج المشتري حقًا غير قابل للتحويل لاستخدام الكمية المشتراة من المنتج ومكوناته في الأبحاث التي يجريها المشتري (سواء كان المشتري جهة أكاديمية أو ربحية). لا يجوز للمشتري بيع أو نقل (أ) هذا المنتج، أو (ب) مكوناته، أو (ج) المواد المصنعة باستخدام هذا المنتج أو مكوناته إلى طرف ثالث، أو استخدام هذا المنتج أو مكوناته أو المواد المصنعة باستخدام هذا المنتج أو مكوناته لأغراض تجارية. تشمل الأغراض التجارية أي نشاط يقوم به أي طرف مقابل عوض، وقد يشمل ذلك، على سبيل المثال لا الحصر: (1) استخدام المنتج أو مكوناته في التصنيع؛ (2) استخدام المنتج أو مكوناته لتقديم خدمة أو معلومات أو بيانات؛ (3) استخدام المنتج أو مكوناته لأغراض علاجية أو تشخيصية أو وقائية؛ أو (4) إعادة بيع المنتج أو مكوناته، سواءً أكان ذلك لاستخدامها في البحث العلمي أم لا. للحصول على معلومات حول شراء ترخيص لهذا المنتج لأي استخدام آخر، يُرجى التواصل مع شركة لايف تكنولوجيز، وحدة أعمال تحليل الخلايا، قسم تطوير الأعمال، 29851 طريق ويلو كريك، يوجين، أوريغون 97402، الولايات المتحدة الأمريكية، هاتف: 5414658300، فاكس: 5413350504. أليكسا فلور™ علامة تجارية مسجلة لشركة لايف تكنولوجيز. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مركب فلوري مزدوج. لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل لف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعرض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بتلك الكواشف، لإضاءة الغرفة.
الوصف: مستنسخ: النمط المصلي: معرف EntrezGene
غير متاح : غير متاح : | IgG1، κ، IgG1، κ، IgG1، κ : N / A