BD، 560547، BD Pharmingen™ APC-Cy™7 مضاد الفئران IL-2

الاسم البديل: Il2؛ إنترلوكين-2؛ عامل نمو الخلايا التائية؛ TCGF
التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG2b للفئران
المستضد: بروتين IL-2 المؤتلف للفأر
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.2 ملغم/مل
RRID: AB_1727544
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على مثبت البروتين و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ APC-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط و APC-Cy7 الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: قياس التدفق الخلوي: يُعدّ الجسم المضاد JES6-5H4 مفيدًا في التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة للإنترلوكين-2 ضمن مجموعات الخلايا المختلطة. ويمكن للباحثين استخدام أحد الكواشف التالية كعنصر تحكم مفيد لإثبات خصوصية التلوين: (1) إنترلوكين-2 الفأري المؤتلف (رقم المنتج 550069) أو (2) الجسم المضاد JES6-5H4 النقي (رقم المنتج 554425)، قبل التلوين. تحضير الخلايا: يمكن للباحثين الذين لا يرغبون في استخدام خلايا MiCK-1 تحضير خلايا طحال الفئران (مثل BALB/c) المحفزة لمدة 4-6 ساعات باستخدام PMA (5 نانوغرام/مل، رقم المنتج P-8139 من Sigma-Aldrich) وأيونوميسين (500 نانوغرام/مل، رقم المنتج I-0634 من Sigma-Aldrich) بوجود 1 ميكروغرام/مل من بريفيلدين أ (BD GolgiPlug™، رقم المنتج 555029). يُنصح الباحثون بتثبيت الخلايا وتسهيل نفاذيتها قبل التلوين.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تحذير: تُظهر بعض مُقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها مع التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا لم تتمكن من تحليل العينات المُثبتة في غضون أربع ساعات، نوصي باستخدام مُثبت BD™ (رقم المنتج 338036). يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: يمكن أن يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري ترادفي؛ لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. يتم جمع انبعاث الفلوركروم المزدوج APC-Cy7 في كاشف لأطوال موجات الفلورة 750 نانومتر وما فوق. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. يتكون APC-Cy7 من فلوروكروم مزدوج من الألوفيوكوسيانين (APC)، الذي يُثار بواسطة خطوط الليزر بين 595 و647 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy7™، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتتألق عند 780 نانومتر. قامت شركة BD Biosciences Pharmingen بتحسين نقل طاقة الفلوركروم في APC-Cy7 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من APC، وتقليل التعويض الإلكتروني المطلوب في أنظمة قياس التدفق الخلوي متعددة الليزر. ملاحظة: على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في الانبعاث المتبقي من APC، يُوصى بشدة باختبار كل دفعة للتحقق من الاختلافات في مقدار التعويض المطلوب، وإجراء فحوصات تحكم فردية للتعويض لكل مُقترن APC-Cy7. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يُرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources.