BD، 560617، BD Pharmingen™ PE-Cy™7 Rat Anti-Mouse CD185 (CXCR5)

الاسم البديل: Blr1؛ مستقبل الكيموكين CXC من النوع 5؛ CXC-R5؛ CXCR-5؛ Gpcr6؛ MDR15
التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: فأر LOU، المعروف أيضًا باسم Louvain، LOU/C، LOU/M IgG2a، κ
المستضد: CXCR5 الفأري
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.2 ملغم/مل
RRID: AB_1727521
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy7 الحر.
إجراءات التحليل الموصى بها: قياس التدفق الخلوي: من المعروف أن مستقبلات الكيموكينات تُستَدخَل إلى داخل الخلايا أثناء المعالجة، مما يؤدي إلى انخفاض تردد التعبير. يُنصح الباحثون بإجراء دراسات النمط الظاهري المناعي لمستقبلات الكيموكينات على عينات حديثة الجمع (أقل من 24 ساعة). يجب أن تتم الحضانة مع الجسم المضاد عند درجة حرارة 4 درجات مئوية في الظلام. ينبغي تقليل المعالجة الخلوية، مثل فصل الخلايا باستخدام الفيكول، أو التجميد، أو التعرض لدرجات حرارة منخفضة قبل التلوين، حيث ثبت أنها تُسبب انخفاضًا في شدة التلوين و/أو نتائج غير متسقة. يجب على الباحثين ملاحظة أنه قد تكون هناك حاجة إلى إجراءات تلوين بديلة. يُوصى بشدة، في بعض الحالات، بإجراء تلوين متعدد الخطوات لتضخيم إشارات التألق المناعي لتحليل قياس التدفق الخلوي لتعبير CXCR5 في الفئران. قد يجد الباحثون أن الجسم المضاد CXCR5 النقي للفئران (رقم المنتج 551961) مفيد بالاقتران مع الكواشف الثانوية والثالثية المناسبة للكشف عن التعبير منخفض التردد، مثل الجسم المضاد IgG2a المضاد للفئران والمُرتبط بالبيوتين (رقم المنتج 553894) وستربتافيدين PE (رقم المنتج 554061) أو ستربتافيدين PE-Cy™7 (رقم المنتج 557598).
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يجب استخدام عينة تحكم متماثلة النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: تُظهر بعض مُقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها عند التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا تعذر تحليل العينات المُثبتة خلال أربع ساعات، نوصي باستخدام مُثبت BD™ (رقم المنتج 338036). يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يُؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. يُعدّ PE-Cy7 فلوروكرومًا مزدوجًا يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بضوء طوله الموجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مُقترنًا بصبغة السيانين Cy7، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة قصوى عند 780 نانومتر. يتم جمع انبعاث فلوروكروم PE-Cy7 المزدوج في كاشف لأطوال موجية للفلورة تبلغ 750 نانومتر فأكثر. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من PE. لذلك، نوصي بإجراء فحوصات تعويض فردية لكل مُقترن PE-Cy7. تم تحسين PE-Cy7 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر، ولا يوجد تداخل يُذكر بين أطياف انبعاث PE-Cy7 وFITC. عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، التي قد تُثير كلاً من PE وCy7 بشكل مباشر، نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليلها. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. لذا، يُرجى تخفيف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. Cy هي علامة تجارية مسجلة لشركة GE Healthcare. يُرجى زيارة http://regdocs.bd.com للاطلاع على صحائف بيانات السلامة (SDS). يُرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.