BD، 560620، BD Pharmingen™ PE-Cy™7 مضاد الفأر CD196 البشري (CCR6)

الاسم البديل: BN-1؛ CC CKR-6؛ مستقبل الكيموكين CC من النوع 6؛ CC-CKR-6؛ CCR-6
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
المستضد: ببتيد CD196/CCR6 البشري
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر
رقم الورشة: IX 48
RRID: AB_1727440
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy7 الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: قياس التدفق الخلوي: من المعروف أن مستقبلات الكيموكينات تُستَدخَل إلى داخل الخلايا أثناء المعالجة، مما يؤدي إلى انخفاض تردد التعبير. يُنصح الباحثون بإجراء دراسات النمط الظاهري المناعي لمستقبلات الكيموكينات على عينات حديثة الجمع (أقل من 24 ساعة). يجب أن تتم الحضانة مع الجسم المضاد عند درجة حرارة 4 درجات مئوية في الظلام. ينبغي تقليل المعالجة الخلوية، مثل فصل الخلايا باستخدام الفيكول، أو التجميد، أو التعرض لدرجات حرارة منخفضة قبل التلوين، حيث ثبت أنها تُسبب انخفاضًا في شدة التلوين و/أو نتائج غير متسقة. يجب على الباحثين ملاحظة أنه قد تكون هناك حاجة إلى إجراءات تلوين بديلة. قد يكون إجراء التلوين متعدد الخطوات مفيدًا، في بعض الحالات، لتضخيم إشارات التألق المناعي لتحليل قياس التدفق الخلوي لتعبير CD196. قد يجد الباحثون أن الجسم المضاد النقي للفأر المضاد لـ CD196 البشري (رقم الكتالوج 559560) مفيد بالاقتران مع الكواشف الثانوية والثالثية المناسبة للكشف عن التعبير منخفض التردد، مثل استخدام Biotin Goat Anti-Mouse Ig (رقم الكتالوج 553999) و PE Streptavidin (رقم الكتالوج 554061) أو PE-Cy™7 Streptavidin (رقم الكتالوج 557598).
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تحذير: تُظهر بعض مقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها مع التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا لم تتمكن من تحليل العينات المثبتة في غضون أربع ساعات، نوصي باستخدام مثبت BD™ (رقم المنتج 338036). يُعدّ PE-Cy7 فلوروكرومًا مزدوجًا يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بضوء طوله الموجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مُقترنًا بصبغة السيانين Cy7، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة قصوى عند 780 نانومتر. يتم جمع انبعاث فلوروكروم PE-Cy7 المزدوج في كاشف لأطوال موجية للفلورة تبلغ 750 نانومتر فأكثر. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من PE. لذلك، نوصي بإجراء فحوصات تعويض فردية لكل مُقترن PE-Cy7. تم تحسين PE-Cy7 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر، ولا يوجد تداخل يُذكر بين أطياف انبعاث PE-Cy7 وFITC. عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، التي قد تُثير كلاً من PE وCy7 بشكل مباشر، نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليلها. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يُؤثر امتصاص الضوء المرئي بشكل كبير على نقل الطاقة في أي مُقترن فلوري مُزدوج؛ لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بها، لإضاءة الغرفة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.