BD، 561036، BD Pharmingen™ PE-Cy™7 مضاد IFN-γ بشري من الفئران

الاسم البديل: IFNG؛ إنترفيرون غاما؛ IFG؛ IFI؛ إنترفيرون من النوع الثاني
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1، κ للفأر BALB/c
المستضد: إنترفيرون غاما البشري من السائل الطافي لخلايا الدم المحيطية أحادية النواة المحفزة ببكتيريا المكورات العنقودية الذهبية
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.2 ملغم/مل
RRID: AB_396894
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy7 الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يُعدّ الجسم المضاد PE-Cy™7 المُستخلص من الفئران والمُضاد للإنترفيرون غاما البشري مفيدًا في التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المُنتجة للإنترفيرون غاما ضمن مجموعات الخلايا المختلطة. للاطلاع على المنهجية المُحددة، يُرجى زيارة موقعنا الإلكتروني http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources، والاطلاع على قسم البروتوكولات تحت عنوان "التلوين داخل الخلايا". يُعدّ حجب الخلايا المُثبتة/المُنفذة مسبقًا باستخدام الجسم المضاد المُستخلص من الفئران والمُضاد للإنترفيرون غاما البشري (رقم المنتج 554549) قبل التلوين إجراءً مفيدًا للتحقق من خصوصية التلوين. وقد وصف كلٌ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية التلوين وضوابط الحجب بالتفصيل. يُعد PE-Cy™7 Mouse IgG1 κ Isotype Control (Cat. No. 557646) عنصر تحكم مناسب من نوع IgG1 للفأر لتقييم مستوى التلوين الخلفي على الخلايا البشرية المثبتة بالبارافورمالديهايد/المنفذة بالصابونين؛ استخدمه بتراكيز مماثلة للأجسام المضادة محل الاهتمام (على سبيل المثال، ¡ 0.5 ميكروغرام mAb/1 مليون خلية).
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. PE-Cy7 هو فلوروكروم مزدوج يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بضوء طوله الموجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy7، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتتألق بأقصى قدر عند 780 نانومتر. يتم جمع انبعاث الفلوركروم المزدوج PE-Cy7 في كاشف لأطوال موجات الفلورة 750 نانومتر وما فوق. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، قد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من PE. لذا، نوصي بإجراء فحوصات تعويض فردية لكل مُقترن PE-Cy7. تم تحسين PE-Cy7 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر، ولا يوجد تداخل يُذكر بين أطياف انبعاث PE-Cy7 وFITC. عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، التي قد تُثير كلاً من PE وCy7 مباشرةً، نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليلها. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يُؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الحاصل في أي مُقترن فلوركروم مزدوج. لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لضوء الغرفة. تحذير: قد تُظهر بعض مُقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها عند التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا تعذر تحليل العينات المُثبتة خلال أربع ساعات، نوصي باستخدام مُثبت BD™ Stabilizing Fixative (رقم المنتج 338036). قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده على جميع الأشكال و/أو التطبيقات. Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.