BD، 561041، BD Pharmingen™ PE-Cy™7 مضاد TNF للفئران

التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1 للفئران
المستضد: عامل نخر الورم الفأري المؤتلف
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.2 ملغم/مل
RRID: AB_396761
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط و PE-Cy7 الحر. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات الفحص الموصى بها: يتوفر الجسم المضاد MP6-XT22 المقترن بـ PE-Cy7 (رقم المنتج 557644) للتلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليلات التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة لعامل نخر الورم (TNF) ضمن مجموعات الخلايا المختلطة (انظر الشكل). وللحصول على أفضل تلوين مناعي فلوري مع تحليل التدفق الخلوي، يجب معايرة هذا الجسم المضاد المضاد للسيتوكين (≤ 0.5 ميكروغرام من الجسم المضاد أحادي النسيلة/مليون خلية). للاطلاع على المنهجية المحددة، يرجى زيارة قسم البروتوكولات أو الفصل الخاص بالتلوين داخل الخلايا للتدفق الخلوي في دليل وظائف المناعة، وكلاهما منشور على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com. يُعدّ أحد الخيارين التاليين ضوابط مفيدة لإثبات خصوصية التلوين: 1) حجب الجسم المضاد MP6-XT22 المقترن مسبقًا بفائض مولاري من الرابط (مثل TNF الفأري المؤتلف؛ رقم المنتج 554589) قبل التلوين، أو 2) حجب الخلايا المثبتة/المنفذة مسبقًا بالجسم المضاد MP6-XT22 غير الموسوم (رقم المنتج 554416) قبل التلوين. وقد وصف كلٌّ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية التلوين وضوابط الحجب بالتفصيل. يُعدّ PE-Cy7-R3-34 (رقم المنتج 557645) ضابطًا مناسبًا من نوع IgG1 للفئران لتقييم مستوى التلوين الخلفي على خلايا الفئران والبشر المثبتة بالبارافورمالديهايد والمنفذة بالصابونين. استخدم ضوابط النوع المتماثل بتراكيز مماثلة لتراكيز الجسم المضاد المطلوب.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى مراجعة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يُعدّ PE-Cy7 فلوروكرومًا مزدوجًا يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بضوء طوله الموجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مُقترنًا بصبغة السيانين Cy7، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة قصوى عند 780 نانومتر. يتم جمع انبعاث فلوروكروم PE-Cy7 المزدوج في كاشف لأطوال موجية للفلورة تبلغ 750 نانومتر وما فوق. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من PE. لذا، نوصي بإجراء فحوصات تعويض فردية لكل مُقترن PE-Cy7. تم تحسين PE-Cy7 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر، ولا يوجد تداخل يُذكر بين أطياف انبعاث PE-Cy7 وFITC. عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، والتي قد تُثير كلاً من PE وCy7 بشكل مباشر، نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليلها. تحذير: تُظهر بعض مُقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها مع التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا لم تتمكن من تحليل العينات المُثبتة خلال أربع ساعات، نوصي باستخدام مُثبت BD™ (رقم المنتج 338036). يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يُؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مُزدوج. لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بها، لضوء الغرفة. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. Cy هي علامة تجارية مسجلة لشركة Amersham Biosciences Limited. يُباع هذا المنتج المقترن بموجب ترخيص من براءات الاختراع التالية: براءات الاختراع الأمريكية رقم 5,486,616؛ 5,569,587؛ 5,569,766؛ 5,627,027. يخضع هذا المنتج لحقوق الملكية الفكرية لشركة Amersham Biosciences Corp. وجامعة كارنيجي ميلون، ويتم تصنيعه وبيعه بموجب ترخيص من شركة Amersham Biosciences Corp. هذا المنتج مرخص للبيع لأغراض البحث العلمي فقط. هذا المنتج غير مرخص لأي استخدام آخر. إذا كنت بحاجة إلى ترخيص تجاري لاستخدام هذا المنتج ولم يكن لديك ترخيص، فيُرجى إعادة هذه المادة غير مفتوحة إلى شركة BD Biosciences، 10975 Torreyana Rd، سان دييغو، كاليفورنيا 92121، وسيتم رد أي مبلغ مدفوع مقابلها.