BD، 561570، مجموعة ترميز الخلايا الفلورية البنفسجية BD Phosflow™

التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
الوصف: تقنية الترميز الخلوي الفلوري هي تقنية تُسهّل تطبيقات قياس التدفق الخلوي متعددة المعايير عالية الإنتاجية، حيث تسمح بدمج عينات متعددة من الخلايا المستهدفة في أنبوب واحد لتلوينها وتحليلها بألوان متعددة. يتم "ترميز" كل عينة خلوية باستخدام صبغة فلورية واحدة أو اثنتين مرتبطتين تساهميًا، حيث تُستخدم كل صبغة بثلاثة تراكيز محددة كحد أقصى. يتيح ذلك تمييز عينات الخلايا بواسطة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان بناءً على أطوال موجات انبعاث الفلورة وشدتها المميزة. يمكن أيضًا تلوين عينات الخلايا المُرمّزة المتعددة بأجسام مضادة فلورية خاصة بمستضدات CD وبروتينات الإشارة المُفسفرة داخل الخلايا. بالتالي، تُمكّن تقنية الترميز الخلوي الفلوري من اتباع نهج عالي الإنتاجية لتحديد خصائص الإشارة لمجموعات فرعية من الكريات البيضاء. تشمل التحليلات التي يمكن أن تستفيد من هذه التقنية (على سبيل المثال لا الحصر) دراسات متعددة المتبرعين، ودراسات استجابة الجرعة، و/أو دراسات المسار الزمني لمعدلات الاستجابة الخلوية (مثل الأدوية، والسيتوكينات، والمنشطات متعددة النسائل، والمواد المساعدة). توفر مجموعة BD Phosflow™ Violet Fluorescent Cell Barcoding Kit كواشف لترميز مجموعات فرعية من الخلايا التائية من عينات الدم الكامل البشري بنجاح، وذلك لدراسة تحفيز البروتينات المفسفرة في مسارات إشارات MAP Kinase وJAK/STAT. تتضمن المجموعة صبغتين فلوريتين، هما صبغة ترميز الخلايا 450 (CBD450) وصبغة ترميز الخلايا 500 (CBD500)، ومحلول غسيل ترميز الخلايا الفلوري، وجسم مضاد واحد خاص بموقع الفسفرة لترميز وتلوين عينات الخلايا المثبتة والمنفذة مناعيًا. تُستخدم صبغات الترميز بتراكيز مختلفة، إما بشكل منفصل أو مجتمعة، لترميز ما يصل إلى ستة عشر عينة خلوية مختلفة. توفر المجموعة خيارًا لاستخدام جسم مضاد خاص بموقع الفسفرة مرتبط بـ Alexa Fluor® 647، والذي يمكن استخدامه لتحليل أحداث الإشارات داخل الخلايا. تتوفر الأجسام المضادة الفسفورية النوعية التالية للاختيار من بينها: ERK1/2 (pT202/pY204)؛ p38 MAPK (pT180/pY182)؛ Stat1 (pY701)؛ Stat3 (pY705)؛ Stat5 (pY694)؛ أو Stat6 (pY641). وقد ثبت أن كلًا من هذه الأجسام المضادة يصبغ الخلايا الليمفاوية المحيطية البشرية المثبتة والمنفذة والمُعَلَّمة بعلامات شريطية. كما تم التحقق من صحة استخدام الأجسام المضادة الفلورية النوعية لعلامات سطح الخلايا التائية مع مجموعة ترميز الخلايا الفلورية البنفسجية، وذلك باتباع إجراءات التثبيت والنفاذية المحددة في هذه المجموعة. يجب طلب كواشف التحلل/التثبيت والنفاذية بشكل منفصل. يمكن تحليل عينات الخلايا المُحضَّرة باستخدام الكواشف المتوفرة في هذه المجموعة أو المحددة فيها، باستخدام أنظمة قياس التدفق الخلوي BD FACSCanto™ II أو BD LSRFortessa™ أو BD™ LSR II.