BD، 561717، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد CD152 الفأري البشري

الاسم البديل: CTLA-4؛ AILIM؛ بروتين الخلايا اللمفاوية التائية السامة 4
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG2a، κ للفأر BALB/c
المستضد: بروتين CTLA4 البشري المؤتلف
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)، التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره أثناء التطوير)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
رقم الورشة: 9 34
معرف جين Entrez: 1493
RRID: AB_396177
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالصبغة في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط والصبغة الحرة.
إجراءات التحليل الموصى بها: يمكن استخدام خرز BD® CompBeads كبديل لتقييم التداخل الفلوري (التعويض). عند ارتباط الأجسام المضادة المقترنة بالفلوركروم بخرز BD® CompBeads، فإنها تمتلك خصائص طيفية مشابهة جدًا للخلايا. مع ذلك، قد توجد اختلافات طفيفة في الانبعاثات الطيفية لبعض الفلوركرومات مقارنةً بالخلايا، مما يؤدي إلى قيم تداخل تختلف عند مقارنتها بالضوابط البيولوجية. يُنصح بشدة، عند استخدام أي كاشف لأول مرة، بمقارنة التداخل على الخلايا وخرز BD® CompBeads للتأكد من ملاءمة خرز BD® CompBeads لتطبيقك الخلوي المحدد.
إشعارات المنتج: يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى مراجعة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر. نظراً لطيف الامتصاص الواسع لصبغة الفلوركروم المزدوجة PE-Cy5، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، والتي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. تتكون PE-Cy5 من صبغة فلورية مزدوجة تتألف من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بواسطة ضوء 488 نانومتر من ليزر أيون الأرجون ويعمل كمانح للطاقة، مقترنة بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة عند 670 نانومتر. وقد حسّنت شركة BD Biosciences Pharmingen نقل طاقة الفلوركروم في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما زاد من شدة انبعاث الفلورة، وقلل من الانبعاث المتبقي من PE، وقلل من التباين بين الدفعات. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة في أي مركب فلوري مزدوج؛ لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بها، لإضاءة الغرفة. وقد أشارت التقارير إلى أن الفلوركرومات المزدوجة PE-Cy5 ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أشارت التقارير إلى أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc. ويمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا مع الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المضاد لـ CD16/CD32 في الفئران، والمُنقّى باستخدام Mouse BD Fc Block™، من الارتباط غير النوعي للكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 بالخلايا البائية للفئران. مع ذلك، لا يُنصح باستخدام الكواشف المقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين الخلايا الطحالية لفئران SJL وNOD وMRL، إذ أُبلغ عن تلوين غير نوعي للخلايا اللمفاوية البائية و/أو أنواع أخرى من الكريات البيضاء بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (حيث يُعتقد أن معقد CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يمكن استخدام الكواشف المقترنة بـ PE وPerCP وPerCP-Cy5.5 وAPC وAPC-Cy7 على الكريات البيضاء من هذه السلالات من الفئران. يُرجى مراجعة http://regdocs.bd.com للاطلاع على بيانات السلامة (SDS). Cy هي علامة تجارية لشركة Global Life Sciences Solutions Germany GmbH أو إحدى الشركات التابعة لها التي تعمل تحت اسم Cytiva. للاطلاع على براءات الاختراع الأمريكية التي قد تنطبق، يُرجى زيارة bd.com/patents.